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關(guān)于細(xì)胞株你都了解嗎？
閱讀：1978發(fā)布時(shí)間：2020-12-10
細(xì)胞株通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株，是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對(duì)于人類腫瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長(zhǎng)穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細(xì)胞株的建立實(shí)驗(yàn)是通過(guò)細(xì)胞與低劑量的藥物長(zhǎng)期接觸，引起細(xì)胞本身生物化學(xué)過(guò)程的改變，細(xì)胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白，使細(xì)胞逐漸對(duì)藥物耐受。
細(xì)胞株的培養(yǎng)小技巧：
1. 買(mǎi)細(xì)胞要去靠譜的地方買(mǎi)，比如 ATCC 或者然泰生物。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹，這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買(mǎi)的細(xì)胞，還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢，可以買(mǎi)個(gè)支原體檢測(cè)的試劑盒定期檢測(cè)一下。
4. 不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同。有的生長(zhǎng)很快，比如說(shuō) MDA-MB-231，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢，比如 BT474，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索。
5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過(guò)久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。
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