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高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(Liquid Chromatograph Mass Spectrometer),簡稱LC-MS,是液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的儀器。它結(jié)合了高效液相色譜-有效分離熱不穩(wěn)性及高沸點(diǎn)化合物的分離能力與質(zhì)譜儀很強(qiáng)的組分鑒定能力,是一種分離分析復(fù)雜、低豐度混合物的有效手段。
應(yīng)用范圍:藥物代謝及藥物動力學(xué)研究、臨床藥理學(xué)研究、天然藥物(中草藥等)開發(fā)研究等。
高效液相色譜--串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀
實(shí)驗(yàn)流程:
1、樣品前處理:
(a)中藥樣品:將中藥樣品使用溶劑溶解后,12000 r·min-1離心5 min。取上清液進(jìn)樣分析;
(b)血漿(血清)、尿液:取一定體積的樣品,進(jìn)行蛋白沉淀(甲醇、乙腈等)、液-液萃?。ㄒ宜嵋阴ァⅲ?,渦旋振搖3 min,12000 r·min-1離心5 min。取上清液,氮?dú)饬鞔蹈?,?fù)溶,12000 r·min-1離心5 min,取上清液進(jìn)樣分析。
(c)糞便或其他組織樣品:將糞便或其他組織樣品勻漿后,參照(b)進(jìn)行處理
2、色譜條件優(yōu)化:
(a)高效液相色譜-更換流動相:改變有機(jī)相(甲醇/乙腈)-緩沖鹽(不同比例的甲酸、磷酸)的比例,從而使得不同分析物在色譜柱上分離,同時(shí)增加或不影響分析物在質(zhì)譜上的離子化,優(yōu)化色譜峰形。
(b)更換色譜柱:針對不同種類的分析物,使用不同類型的色譜柱,使得分析物在色譜柱上有良好的保留,同時(shí)分離度良好(R≥1.5)。
3、質(zhì)譜條件優(yōu)化:
(a)高效液相色譜-質(zhì)譜掃譜:根據(jù)不同分析物的分子質(zhì)量,進(jìn)行質(zhì)譜掃譜,確定母離子、子離子及相關(guān)質(zhì)譜參數(shù)。
(b)質(zhì)譜條件建立:根據(jù)上述質(zhì)譜掃譜結(jié)果,建立質(zhì)譜檢測方法,確保分析物在質(zhì)譜上的特異性及高靈敏度。
4、方法學(xué)確證:針對不同的檢測項(xiàng)目(中藥含量測定、生物樣品中的藥物檢測等),依據(jù)不同的相關(guān)法律、法規(guī),對精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性、線性等方法學(xué)項(xiàng)目進(jìn)行確證,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、可信性、重復(fù)性。
5、檢測及數(shù)據(jù)分析。
服務(wù)說明及結(jié)果:
1.客戶提供:
藥品:中藥提取液、中藥凍干粉等
血漿或血清:大于100 μL(需提供一定體積的空白血漿)
尿液:大于500 μL(需提供一定體積的空白尿液)
糞便或其他組織樣品:10~100 mg2.公司提供:基本實(shí)驗(yàn)步驟、樣品前處理、檢測結(jié)果、數(shù)據(jù)處理過程及原始數(shù)據(jù)。
3.實(shí)驗(yàn)周期:25~30個(gè)工作日。
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