相信使用液相色譜儀的同學(xué)們,每天都在跟甲醇和乙腈打交道。但是你知道,為啥液相色譜儀流動(dòng)相基本只用甲醇和乙腈嗎?
當(dāng)然,液相色譜流動(dòng)相還有水、以及往水里面添加的一些酸、堿或者緩沖鹽。但是我們今天只討論有機(jī)相這個(gè)部分,水相部分下次有機(jī)會(huì)再來(lái)聊。
要回答這個(gè)問(wèn)題,那就得要了解一下液相色譜對(duì)于溶劑的一般要求是什么。讓我們一起,從一般的常識(shí)出發(fā),來(lái)討論一下這個(gè)問(wèn)題。
01溶解度
首先,流動(dòng)相必須對(duì)被分析的樣品有一定的溶解度,對(duì)吧?
這個(gè)問(wèn)題非常直接。如果樣品在流動(dòng)相中不溶解,那即使你使用了其他溶劑將樣品溶解,但只要樣品一進(jìn)入液相系統(tǒng),一接觸到流動(dòng)相,便會(huì)產(chǎn)生析出,直接堵塞系統(tǒng),根本不可能進(jìn)行分析。
絕大多數(shù)時(shí)候,都建議采用流動(dòng)相來(lái)溶解和稀釋樣品。如果用來(lái)稀釋樣品的溶劑跟流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度差距比較大的時(shí)候,就可能造成樣品出峰拖尾的現(xiàn)象,我們把這個(gè)現(xiàn)象叫做液相色譜的“溶劑效應(yīng)"。
02腐蝕性
其次,流動(dòng)相溶劑不應(yīng)該對(duì)液相系統(tǒng)有腐蝕性。
液相系統(tǒng)中與流動(dòng)相接觸的管路大多數(shù)情況下都是不銹鋼的。這是一種高規(guī)格的316不銹鋼,它具有很強(qiáng)的抗腐蝕性。但是有些溶劑對(duì)于不銹鋼卻有很強(qiáng)的腐蝕性,比如氯仿,以及可能含有過(guò)氧化物色譜級(jí)醚等等。
有些時(shí)候,我們也喜歡使用PEEK管路和接頭,因?yàn)樗鼈儼惭b拆卸起來(lái)比較方便。雖然PEEK材質(zhì)也有很好的化學(xué)惰性,但是長(zhǎng)期在二甲基亞砜、二氯甲烷及四氫呋喃等溶劑環(huán)境下,也會(huì)出現(xiàn)變脆和破裂。
03紫外吸收
另外,液相流動(dòng)相溶劑對(duì)于紫外線是應(yīng)該是透明的。
因?yàn)橐合嗌V中的大多數(shù)檢測(cè)都使用紫外檢測(cè)器來(lái)檢測(cè)的,這樣就不會(huì)對(duì)我們要檢測(cè)的樣品產(chǎn)生干擾。
但是對(duì)于低于 220nm 的低紫外波長(zhǎng)的檢測(cè),這可能是個(gè)問(wèn)題,因?yàn)槟愫茈y找到*透明的溶劑。
如果在你選取的檢測(cè)波長(zhǎng)下,使用的流動(dòng)相溶劑有著一定的紫外吸收,也就是說(shuō)它不是*透明的,那么,你的檢測(cè)特異性就不那么強(qiáng)了,樣品定量結(jié)果的線性也會(huì)受影響。
當(dāng)然,如果你使用的是梯度洗脫條件,那么最直接的現(xiàn)象就是檢測(cè)基線的漂移了。
從這個(gè)角度來(lái)看,乙腈是更加優(yōu)于甲醇的,因?yàn)橐译娴淖贤饨刂共ㄩL(zhǎng)是190nm,而甲醇是210nm。在低波長(zhǎng)的檢測(cè)中,乙腈可以提供更加平整的基線和更好的定量結(jié)果。