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TIM-3 ELISA 試劑盒
TIM-3 ELISA 試劑盒是一款用于體外精準定量檢測生物樣本中 T 細胞免疫球蛋白黏蛋白分子 - 3（TIM-3）含量的專業(yè)工具。TIM-3 作為一種重要的免疫調(diào)節(jié)分子，主要表達于效應 T 細胞、自然殺傷細胞、巨噬細胞及樹突狀細胞等多種免疫細胞表面，在免疫反應的調(diào)控中發(fā)揮著核心作用。
在正常生理狀態(tài)下，TIM-3 參與免疫反應的負向調(diào)控，防止免疫細胞過度活化，維持免疫系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)平衡。當機體面臨疾病侵襲時，TIM-3 的表達水平會出現(xiàn)顯著變化。在慢性病毒感染性疾病，如艾滋病、丙型肝炎中，病毒持續(xù)存在導致免疫細胞長期處于激活狀態(tài)，TIM-3 表達上調(diào)，使得免疫細胞功能耗竭，難以有效清除病毒，檢測 TIM-3 含量能夠評估病毒感染后免疫功能的受損程度，為治療方案的制定和療效監(jiān)測提供依據(jù)。在自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化癥中，TIM-3 的異常表達破壞免疫平衡，引發(fā)免疫細胞對自身組織的攻擊，通過檢測 TIM-3 水平，有助于深入了解疾病發(fā)病機制，輔助病情監(jiān)測與治療決策。在腫瘤領域，腫瘤微環(huán)境促使 TIM-3 在腫瘤浸潤淋巴細胞上高表達，導致免疫細胞對腫瘤細胞的殺傷活性受到抑制，腫瘤細胞得以免疫逃逸、增殖和轉(zhuǎn)移，因此檢測 TIM-3 含量對于腫瘤的早期診斷、預后評估以及免yi治療方案的優(yōu)化具有重大意義。
該試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術。試劑盒的核心組件是預包被有抗人 TIM-3 單克隆抗體的微孔板。當加入血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等生物樣本后，樣本中的 TIM-3 會特異性地與包被抗體結(jié)合。完成結(jié)合反應后，通過嚴謹設計的洗板步驟，能夠有效去除未結(jié)合的雜質(zhì)，為后續(xù)檢測創(chuàng)造純凈環(huán)境。隨后，加入酶標抗人 TIM-3 抗體，它會與已結(jié)合在包被抗體上的 TIM-3 進一步結(jié)合，形成穩(wěn)定的抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。再次進行洗板操作，徹di清除未結(jié)合的酶標抗體，接著加入底物 A 和底物 B 啟動顯色反應。在辣根過氧化物酶（HRP）的催化作用下，底物發(fā)生反應，顏色逐漸顯現(xiàn)，且顏色的深淺與樣本中 TIM-3 的含量呈正相關。使用者借助酶標儀在特定波長下測定吸光度（OD 值），依據(jù)預先繪制好的標準曲線，即可精準計算出樣本中 TIM-3 的濃度。
試劑盒組成科學合理，包含預包被微孔板、標準品、酶標抗體、底物 A、底物 B、終止液、濃縮洗滌液以及樣本xi釋液等。從原材料的嚴格篩選采購，到生產(chǎn)過程中的精細制作，再到成品的多輪嚴格檢驗，每一個環(huán)節(jié)都層層把關，確保為使用者提供質(zhì)量穩(wěn)定、結(jié)果準確的試劑盒。
在操作流程方面，首先要根據(jù)樣本類型進行妥善處理。血清樣本需自然凝固后離心取上清；血漿樣本則需使用合適的抗凝劑處理后離心；細胞培養(yǎng)上清樣本若有沉淀需先離心去除。接下來，合理設置標準品孔和樣本孔，分別準確加入標準品和經(jīng)過稀釋的樣本。將微孔板放入 37℃恒溫箱中溫育，使抗原抗體充分反應。溫育結(jié)束后，進行洗板操作，這一步至關重要，務必保證洗滌充分，防止殘留物質(zhì)干擾實驗結(jié)果。加入酶標抗體后再次溫育，由于底物對光敏感，在加入底物進行顯色時，必須在避光條件下操作。顯色達到規(guī)定時間后，加入終止液終止反應，最后使用酶標儀讀取 OD 值。值得注意的是，不同批次的試劑盒組分嚴禁混用，整個操作過程必須嚴格按照試劑盒說明書進行，以此保障檢測結(jié)果的可靠性和準確性。
