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Z小抑菌濃度測定試驗（營養(yǎng)肉湯稀釋法）
1 原 理
本試驗將不同濃度的抑菌劑混合溶解于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，然后接種細菌，通過細菌的生長與否，確定抑菌劑抑制受試菌生長的zui低濃度，即zui小抑菌濃度（MIC）。本方法適用于溶出性抑菌產(chǎn)品zui低抑菌濃度的測定。
2 實驗器材
（1）實驗菌株 金黃色葡萄球菌（ATCC 6538），大腸桿菌（8099或ATCC 11229），可根據(jù)抑菌劑的用途，選擇特定的菌株
（2）營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基
（3）稀釋液
（4）吸管、試管
（5）37℃恒溫培養(yǎng)箱。
3 操作步驟
（1）制備金黃色葡萄球菌、大腸桿菌懸液
（2）含抗菌劑培養(yǎng)基配制：將抗（抑）菌溶液用蒸餾水做對倍系列稀釋成不同濃度的受試液，取各稀釋度受試液 2.5mL 加入到含 2.5mL 雙倍濃度營養(yǎng)肉湯的試管中。
（3）取 0.1mL 含菌量約為 108
cfu/mL 菌懸液接種于含抗（抑）菌劑的營養(yǎng)肉湯的試管中，作為試驗組樣本。
（4）以同樣方法接種不含抗（抑）菌劑的營養(yǎng)肉湯的試管中，作為陽性對照組樣本。
（5）取2支含營養(yǎng)肉湯的試管，作為陰性對照組樣本。
（6）將試驗組樣本、陽性對照組樣本及陰性對照組樣本放置 37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng) 48h，觀察結(jié)果。
（7）試驗中應將試驗用菌懸液進行活菌培養(yǎng)計數(shù)，其作用濃度應為 5×105cfu/mL～5×106cfu/mL。
4 評價規(guī)定
當陽性對照管有細菌生長（混濁），陰性對照管無菌生長（透明），試驗用菌懸液的作用濃度為 5×105cfu/mL～5×106cfu/mL 時， 試驗組無菌生長的zui高稀釋度所對應的抗（抑）菌劑濃度，為該樣品對受試菌的MIC。
5 注意事項
接種時，應由低抗（抑）菌劑濃度向高濃度依次接種。