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            上海信裕生物科技有限公司
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            當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>細胞系>>感受態(tài)細胞>> Rosetta(DE3) Chemically Competent Cell

            Rosetta(DE3) Chemically Competent Cell

            參   考   價: 990

            訂  貨  量: ≥1  件

            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌其他品牌

            廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

            所  在  地上海

            更新時間:2020-09-02 16:09:45瀏覽次數(shù):740次

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            純度 99.99% 供貨周期 現(xiàn)貨
            規(guī)格 100μl/支 貨號 XY9057
            應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 主要用途 Rosetta(DE3)菌株具有氯霉素抗性,補充大腸桿菌缺乏的6 種稀有密碼子(
            Rosetta(DE3) Chemically Competent Cell 具有氯霉素抗性,補充大腸桿菌缺乏的6 種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)對應的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平,該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū) (DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶),同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶。

            Rosetta(DE3) Chemically Competent Cell 

             

            產(chǎn)品規(guī)格

             

            Rosetta(DE3):                                           100μl/支

            pUC19 (control vector,10pg/μl):                    10μl

            保存條件(保質(zhì)期):                             -80℃(6個月) 

             

            基因型

            F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm(DE3) pRARE(argU, argW, ilex, glyT, leuW, proL) (CamR)

             

            Rosetta(DE3) Chemically Competent Cell 產(chǎn)品說明

            Rosetta(DE3)菌株具有氯霉素抗性,補充大腸桿菌缺乏的6 種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)對應的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平,該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū) (DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶),同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達。Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞由特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高達10cfu/μg DNA。

             

            操作方法

            1. Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

            2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

            3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

            4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。

            5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

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