細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作,看這里一學(xué)就會(huì)
上海雙贏生物實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作步驟和注意事項(xiàng):
1.打開(kāi)無(wú)菌工作臺(tái)及凈化室的紫外燈,消毒半小時(shí)以上。
2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)超凈臺(tái)風(fēng)機(jī),等待30min以上,以排盡臭氧。
3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。
4.風(fēng)淋2分鐘。
5.0.1%過(guò)氧乙酸水泡手,擦干。
6.點(diǎn)燃酒精燈;超凈臺(tái)內(nèi)應(yīng)避免放入過(guò)多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。
7.打開(kāi)各類(lèi)瓶蓋前先過(guò)火,以固定灰塵;打開(kāi)的瓶口、試管口過(guò)火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。
8.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺(tái),應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開(kāi)直立。
9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個(gè)不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開(kāi)培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。
10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺(tái)上的液體,立即用酒精棉球擦凈。
11.操作完畢后恢復(fù)工作臺(tái)面。