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| 參考價 | ￥300-￥5000 | /盒 |
參考價：￥300 ~ ￥5000
更新時間：2024-11-23 11:43:17瀏覽次數(shù)：1348評價
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/48樣 50管/24樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | EY-01S1230 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)生化檢測試劑盒 | 100管/48樣 50管/24樣 | EY-01S1230 |
測定意義：
海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖，是由兩個糖分子組成的一個非還原性雙糖，能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細胞表面形成的保護膜，有效地保護生物分子結構不被破壞，從而維持生命體的生命過程和生物特征。
植物體內主要以糖為底物合成海藻糖，海藻糖-6-磷酸酯酶 （trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP）是該途徑中海藻糖合成關鍵酶之一，該反應首先在海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸糖（UDPG）和 6-磷酸糖生成中間產物6-磷酸海藻糖，再在TPP的作用下去磷酸化，生成海藻糖。
測定原理：
TPP 催化海藻糖-6-磷酸產生海藻糖，同時釋放出磷酸根，使用鉬銻抗比色法測定。
需自備的儀器和用品：
酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑一：液體×1瓶，室溫保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×2瓶，－20℃保存。臨用前加入22mL試劑二，現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑四：液體×1支，4℃保存。
1、組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。16000g，4℃離心20min，取上清置冰上待測。
2、細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；16000g， 4℃離心20min，取上清液置冰上待測。
3、血清等液體：直接測定。
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（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
（3）按細胞數(shù)量計算
活性單位定義：25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細胞數(shù)量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103L/mol/cm；d：比色皿光徑，1 cm；V反總：反應體系總體積，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；V樣：加入反應體系中上清液體積，100μL=0.1 mL；T：反應時間，1min。
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