導(dǎo) 讀

2020版《中國(guó)藥典》已于今年6月正式發(fā)布，并將于12月30日起開(kāi)始實(shí)施。2020版與此前版本的藥典相比，有多處重要的增刪與修改，四部新增《9306 遺傳毒性雜質(zhì)控制指導(dǎo)原則》為其中之一。該指導(dǎo)原則的出現(xiàn)，為遺傳毒性雜質(zhì)的控制提供了理論依據(jù)。據(jù)此，藥典二部又在十種藥物項(xiàng)下規(guī)定了對(duì)磺酸烷基酯類和N-亞硝胺類遺傳毒性雜質(zhì)的監(jiān)控要求。如何建立遺傳毒性雜質(zhì)的監(jiān)控能力成為一些制藥企業(yè)與檢測(cè)機(jī)構(gòu)必須完成的挑戰(zhàn)，需盡早做好相應(yīng)準(zhǔn)備。 

什么是遺傳毒性雜質(zhì)，新版藥典為什么要加入這些內(nèi)容，具體都有哪些規(guī)定呢？讓小編為你一一解讀。

 新版藥典遺傳毒性雜質(zhì)內(nèi)容的解讀

根據(jù)新版藥典的定義，遺傳毒性雜質(zhì)（genotoxic impurities）是指能引起遺傳毒性的雜質(zhì)，包括致突變性雜質(zhì)和其他類型的無(wú)致突變性雜質(zhì)。其主要來(lái)源于原料藥或制劑的生產(chǎn)過(guò)程，如起始原料、反應(yīng)物、催化劑、試劑、溶劑、中間體、副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物等。

新版藥典之所以要增加遺傳毒性雜質(zhì)的內(nèi)容是為了加強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)，參考了人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求協(xié)調(diào)會(huì)（ICH）相關(guān)指導(dǎo)原則。

藥典四部新增《9306 遺傳毒性雜質(zhì)控制指導(dǎo)原則》，用于指導(dǎo)藥物遺傳毒性雜質(zhì)的危害評(píng)估、分類和限制規(guī)定，以控制藥物中遺傳毒性雜質(zhì)潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)，為藥品標(biāo)準(zhǔn)制修訂，上市藥品安全性再評(píng)估提供參考。

藥典二部有10種藥物明確指出在必要時(shí)，應(yīng)采用適宜的分析方法對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行分析，以確認(rèn)相關(guān)遺傳毒性雜質(zhì)的含量符合我國(guó)藥品監(jiān)管部門相關(guān)指導(dǎo)原則或ICH M7指導(dǎo)原則的要求。這10種藥物關(guān)于遺傳毒性雜質(zhì)的規(guī)定列表如下：

為了更好的推進(jìn)磺酸烷基酯及N-亞硝胺的檢測(cè)方法，島津根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)開(kāi)發(fā)了多種檢測(cè)方案。

 島津解決方案之磺酸烷基酯篇

磺酸烷基酯

磺酸烷基酯一般是在磺酸鹽類藥物生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的，2007年6月制藥*羅氏制藥公司在歐盟國(guó)家銷售的一種抗HIV藥物甲磺酸奈非那韋某些批次檢出了甲磺酸乙酯，該事件導(dǎo)致此種藥物在歐盟市場(chǎng)一度停售，直到羅氏修正了工藝并增加對(duì)甲磺酸乙酯的控制，此后多個(gè)國(guó)家及組織均加強(qiáng)了對(duì)磺酸烷基酯的監(jiān)控。

磺酸烷基酯結(jié)構(gòu)，R1為甲基、苯基或甲苯基，R2為烷基

磺酸烷基酯的分類

不同的磺酸鹽藥物中需要檢測(cè)的磺酸烷基酯的種類是不同的，下表羅列了各種磺酸鹽原料藥需要檢測(cè)的磺酸烷基酯的種類。

方案1   頂空+色相色譜質(zhì)譜

島津HS-20+ GC-MS分析系統(tǒng)

島津頂空自動(dòng)進(jìn)樣器特點(diǎn)主要有：

•均一穩(wěn)定的恒溫控制技術(shù)，的重現(xiàn)性

•加熱爐可以位重疊加熱，提高分析效率

•混合振蕩功能，可使樣品快速達(dá)到平衡，縮短分析時(shí)間

各磺酸烷基酯衍生物SIM色譜圖

方法原理：在頂空條件下使用碘化鈉將磺酸烷基酯衍生為的碘代烷烴，然后使用氣質(zhì)檢測(cè)。

方法特點(diǎn)：前處理簡(jiǎn)單，對(duì)儀器污染小，但不能同時(shí)檢測(cè)不同類的磺酸烷基酯。

方案2  氣相色譜質(zhì)譜

島津GC-MS分析系統(tǒng)

島津氣質(zhì)特點(diǎn)主要有：

•高靈敏度抗污染型離子源，良好的穩(wěn)定性

•強(qiáng)勁大容量真空系統(tǒng)，大幅度縮短質(zhì)譜開(kāi)機(jī)后的穩(wěn)定(抽真空)時(shí)間

•OD Lens雙偏轉(zhuǎn)透鏡，聚焦目標(biāo)離子，減低噪音

八種磺酸酯標(biāo)準(zhǔn)品TIC色譜圖

方法原理：藥品溶于乙酸乙酯后有機(jī)濾膜過(guò)濾，直接采用氣質(zhì)檢測(cè)。

方法特點(diǎn)：可以同時(shí)檢測(cè)不同類的磺酸烷基酯，基質(zhì)復(fù)雜樣品檢測(cè)效果可能欠佳。

方案3  三重四極桿氣相色譜質(zhì)譜

島津GCMSMS分析系統(tǒng)

GCMSMS NX系列氣質(zhì)還具有以下特點(diǎn)：

•ClickTek技術(shù)儀器維護(hù)更方便

•新一代AFC全惰性流路，提供更高的檢測(cè)精度

•智能鐘、Smart EI/CI 復(fù)合源提高實(shí)驗(yàn)效率

八種磺酸酯標(biāo)準(zhǔn)品MRM色譜圖

方法原理：藥品溶于乙酸乙酯，，有機(jī)濾膜過(guò)濾后使用三重四極桿氣質(zhì)檢測(cè)。

方法特點(diǎn)：可以同時(shí)檢測(cè)不同類的磺酸烷基酯，三重四極桿氣相色譜質(zhì)譜抗干擾能力強(qiáng)可用于復(fù)雜基質(zhì)樣品的檢測(cè)

 島津解決方案之N-亞硝胺篇 

N-亞硝胺

N-亞硝胺類化合物是一類強(qiáng)致癌有機(jī)化合物，它由前體物質(zhì)硝酸鹽、亞硝酸鹽和胺類通過(guò)化學(xué)或生物學(xué)途徑合成。典型代表化合物有N，N-二甲基亞硝胺（NDMA）、N，N-二乙基亞硝胺（NDEA）。2018年被爆出沙坦類藥物中含有遺傳毒性雜質(zhì)NDMA，尤其是纈沙坦和氯沙坦尤為嚴(yán)重。

N-亞硝胺化合物結(jié)構(gòu)

方案1  液相色譜

高130Mpa的高耐壓，完美應(yīng)對(duì)各種分析

•高通量自動(dòng)進(jìn)樣器，實(shí)現(xiàn)樣品的連續(xù)分析

•可配備流動(dòng)相精靈，診斷精靈以及修復(fù)精靈

•新設(shè)計(jì)的三維中文色譜軟件，符合GMP標(biāo)準(zhǔn)

NDMA和NDEA 均在10min以內(nèi)出峰，分離度良好，5 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液靈敏度輕松滿足ANSM French OMSL法規(guī)要求。

方案2  三重四極桿氣相色譜質(zhì)譜

下圖為6種N-亞硝胺定量限MRM圖，峰型完美。應(yīng)對(duì)歐洲藥典質(zhì)量控制要求so easy。

方案3  液相色譜質(zhì)譜

•UF-Swiching技術(shù):真正意義上實(shí)現(xiàn)了正、負(fù)離子同時(shí)采集；

•UF-Scaning技術(shù):掃描速度可達(dá)30000u/sec；

•UF- Sweeper Ⅲ技術(shù)：離子碰撞過(guò)程的超低串?dāng)_；

•UF- Senstivity技術(shù)：三重脫溶劑系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)超高靈敏度;

輕松再現(xiàn)FDA和EDQM法規(guī)中規(guī)定的NDMA和NDEA檢測(cè)方法，并使用LabSolutions軟件實(shí)現(xiàn)了內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法同時(shí)定量。

5.0 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)樣品MRM色譜圖

島津自1875年創(chuàng)業(yè)以來(lái)，始終秉承創(chuàng)始人島津源藏的創(chuàng)業(yè)宗旨“以科學(xué)技術(shù)向社會(huì)做貢獻(xiàn)”，不僅視自己為儀器供應(yīng)商，而且努力向各個(gè)行業(yè)的用戶分享島津豐富的專業(yè)資源和強(qiáng)大的應(yīng)用支持。為應(yīng)對(duì)制藥行業(yè)相關(guān)用戶對(duì)遺傳毒性雜質(zhì)的檢測(cè)需求，島津公司開(kāi)發(fā)了基于LC、GCMS、HS-GCMS、GC-MS/MS以及LC-MS/MS等平臺(tái)的相關(guān)藥物中遺傳毒性雜質(zhì)的檢測(cè)方法。島津分析中心也精心推出《沙坦類藥物中遺傳毒性雜質(zhì)檢測(cè)方案》和《藥品中遺傳毒性雜質(zhì)檢測(cè)整體解決方案》，希望我們的工作對(duì)您有所幫助。