本文由中國藥科大學天然藥物國家重點實驗室藥物代謝與藥代動力學重點實驗室所作，發(fā)表于Bioanalysis (2015) 7(7), 885–894。

目的：建立生物樣品中治療性肽的定量分析方法。材料與方法:以奧曲肽為模型治療肽，合成氧化奧曲肽作為內(nèi)標。采用蛋白沉淀結(jié)合液-液萃取技術(shù)，有效提高了回收率，減少了內(nèi)源性干擾。根據(jù)FDA指南，對血漿中奧曲肽的LC-MS/MS定量方法進行了優(yōu)化和驗證。結(jié)果:線性、選擇性、準確度、精密度、穩(wěn)定性、基質(zhì)效應(yīng)和回收率均符合FDA指南生物分析方法驗證驗收標準。該方法已成功地應(yīng)用于奧曲肽的研究。結(jié)論:該方法可用于奧曲肽和其他治療性肽的藥代動力學研究。

使用儀器：島津LCMS-8050

圖 大鼠血漿中一種奧曲肽樣品制備過程

圖 奧曲肽和氧化奧曲肽的代表性質(zhì)譜圖。(A)乙腈蛋白沉淀法制備的空白血漿;(B)蛋白沉淀結(jié)合液液萃取法制備的空白血漿;(C)加入奧曲肽(50.0 ng/ml)和內(nèi)標的空白血漿;(D) 加入奧曲肽(0.5 ng/ml)和內(nèi)標的空白血漿;(E)大鼠靜脈注射奧曲肽0.1 mg/kg后2h采集血漿。AQT: 奧曲肽; C-A: 氧化奧曲肽

圖 大鼠血漿中奧曲肽的校準曲線，濃度范圍為0.5-500.0ng/ml

表 大鼠奧曲肽靜脈注射0.1 mg/kg和灌胃45 mg/kg后的主要藥代動力學參數(shù)

在臨床研究中，已經(jīng)發(fā)表了幾種用于奧曲肽定量的生物分析方法。然而，由于這些文獻在樣品處理技術(shù)、內(nèi)標選擇和檢測方式等方面的差異，很難選擇一種穩(wěn)定的檢測方法。此外，就我們所知，對奧曲肽的臨床前藥代動力學特征知之甚少。

•開發(fā)的以氧化奧曲肽為內(nèi)標的大鼠血漿中奧曲肽的LC-MS/MS定量方法已根據(jù)美國指南進行了充分驗證。

•線性、準確度、精密度、基質(zhì)效應(yīng)和回收率符合FDA指南中的生物分析方法驗證驗收標準。

•所建立的LC-MS/MS方法在大鼠血漿中表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。

•上述方法已成功應(yīng)用于奧曲肽的藥代動力學研究。

•目前奧曲肽在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究將為奧曲肽的開發(fā)和合理使用提供有益的信息。

•目前開發(fā)的方法只需稍加修飾，可以用于其他治療性肽類的藥代動力學研究。

文獻題目

《PK study of octreotide based on LC-MS/MS combining protein precipitation and impurity extraction technique》

使用儀器

島津LCMS-8050

作者

Qian Wang**,1, Yan Liang*,1,Tai Rao**,1, Lin Xie1. Wei Ye1, Hanxu Fu1, Liiun Zhou1,Rong Xing1,2, Yuhao Shao1,Jingcheng Xiao1, Dian Kang1&Guangji Wang1

1 Key Lab of Drug Metabolism&Pharmacokinetics, State Key Laboratory of Natural Medicines, China Pharmaceutical University, Tongjiaxiang 24, Nanjing 210009, China

2 Department of Pharmacy, the First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, Bengbu, Anhui, 233004,China

* Author for correspondence

**Authors contributed equally