您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>ATCC細(xì)胞核移植技術(shù)
ATCC細(xì)胞從2-4月齡成熟母鼠獲得,未成熟支持細(xì)胞從0-5日齡未成熟雄鼠獲得。卵丘細(xì)胞通過透明質(zhì)酸酶脫顆粒細(xì)胞獲得。未成熟睪支持細(xì)胞獲得方法如下:
取下的小鼠睪用0.1mg/ml膠原酶與0.01mg/ml脫氧核糖核酸酶37℃處理30min,然后用0.2mg/ml胰蛋白酶37℃處理5min,去睪懸液即可。睪懸液用含4mg/ml BSA的PBS洗一下就可用于顯微注射了。未成熟睪細(xì)胞根據(jù)其體積與形態(tài)即可確認(rèn)。
MII期受體卵母ATCC細(xì)胞在37℃條件下去核,操作液為含5µg/ml CB的Hepes-KSOM。BDF1染色體在Nomarski光學(xué)鏡下能夠很容易的辨認(rèn),利用Piezo裝置將紡錘體及其周圍少量胞質(zhì)取出。去核的卵母細(xì)胞在KSOM液中孵育30min-2h使其胞膜*恢復(fù)。供體細(xì)胞在室溫下、Hepes-KSOM液中利用Piezo裝置注入去核卵母細(xì)胞中。供體細(xì)胞的核沒有必要從細(xì)胞質(zhì)中*弄出來,因?yàn)槁亚鸺?xì)胞與未成熟睪支持細(xì)胞的胞膜都是軟的,在注射時(shí)它們的胞膜很容易破。注射了體細(xì)胞的卵母細(xì)胞在KSOM中孵育1-2h使體細(xì)胞的染色質(zhì)凝集。重構(gòu)胚在無Ca2、含3mM SrCl2 與5µg/ml CB的KSOM液中孵育1h,然后在含5µg/ml CB的KSOM液中孵育5h,zui后移入單純的KSOM液中培養(yǎng)72h。
72h后發(fā)育到桑囊胚階段的重構(gòu)胚移植入8-12周齡假孕3d的ICR雌鼠(小鼠見栓當(dāng)天稱為*)子宮中。8-10枚胚胎移入一側(cè)子宮(16-20枚胚胎移入一種受體小鼠)。ATCC細(xì)胞在第20d時(shí),檢測(cè)受體小鼠中成活的胚胎,活著的小鼠讓泌乳ICR雌鼠哺乳。
含量測(cè)定 氟比洛芬酯 對(duì)照品 100696-200401 200mg
HPLC法含量測(cè)定 鹽酸舍曲林 對(duì)照品 100702-200401 50mg
HPLC法含量測(cè)定 馬來酸依那普利 對(duì)照品 100705-200401 100mg
HPLC檢查 依那普利雙酮 對(duì)照品 100706-200401 30mg
HPLC系統(tǒng)適應(yīng)性檢查 依那普利拉 對(duì)照品 100707-200401 30mg
含量測(cè)定(HPLC) 蘭索拉唑 對(duì)照品 100709-200501 100mg
ATCC細(xì)胞
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。