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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            人孤腓肽(OFQ/N)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟

            時(shí)間:2022/11/22閱讀:218
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            人孤腓肽(OFQ/N)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟:

            1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

            2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

            4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

            6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

            7. 溫育:操作同3。

            8. 洗滌:操作同5。

            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

            10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

            11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)Alpha 1 acid glycoprotein 2 0.2ml

            磷酸化水通道蛋白2抗體phospho-AQP2(Ser264+261) 0.1ml

            細(xì)胞酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶抗體ATTY 0.2ml

            抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體Vasopressin 0.1ml

            ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體ABCF1 0.1ml

            醛糖還原酶抗體AKR1B1 0.2ml

            人血清白蛋白抗體Serum albumin 0.1ml

            活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體ATF4 0.1ml

            腺苷酸激酶-1抗體Adenylate Kinase 1 0.2ml

            纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體F-Actin 0.1ml

            聚集蛋白抗體Agrin 0.1ml

            調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體AIF 0.1ml

            調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體AIF 0.1ml

            間變型淋巴瘤激酶抗體ALK 0.2ml

            膜粘連蛋白A1抗體Annexin A1 0.1ml




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