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            人洛絲蛋白(RELN)ELISA試劑盒操作步驟

            時間:2022/11/30閱讀:207
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            人洛絲蛋白(RELN)ELISA試劑盒操作步驟:


            1. 標準品的加樣:設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。


            2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


            3. 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。


            4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。


            5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。


            6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


            7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 


            8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。


            9. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

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