人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人正常前列腺上皮細胞；RWPE-1圖片
形態(tài)特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  腫瘤抑制基因： p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時，在雄激素作用下，RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE 
培養(yǎng)條件   這株細胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分： 角化細胞無血清培養(yǎng)基K-SFM，kit目錄號17005-042。隨kit提供這株細胞生長所需的兩種添加劑（牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長因子EGF）。 配制*生長培養(yǎng)基，需添加以下成分： 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(52+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

丁酸鈉    1g
丁酰膽堿酯酶    500U
定影粉    1袋
動態(tài)顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒    48 次
動態(tài)濁度法內(nèi)毒素定量試劑盒    1.7mL×10 支
動物 DNAout    100mL
動物 DNAout    250mL
動物 RNAout(TRIzol)     100mL
動物 RNAout(TRIzol)     250mL
動物上皮細胞生長因子    5mL
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    100 次
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    25 次
動物細胞裂解液 A    50mL
動物細胞裂解液 B    50mL
動物粒體純化試劑盒 ( 粗提 )    15 次
動物粒體純化試劑盒 ( 精提 )    15 次
動物粒體總蛋白提取劑盒    50 次
動物種屬鑒定 PCR Mix 1    100 次
動物種屬鑒定 PCR Mix 2    100 次
動物種屬鑒定 PCR Mix 3    100 次
動物種屬鑒定 PCR Mix 4    100 次1a，1b-dihomo Prostaglandin E1 （1 mg）9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-1a，1b-dihomo-prost-13E-en-1-oic acid； 1a，1b-dihomo PGE1； 1a，1b-dihomo Prostaglandin E1
N-pentadecanoyl-L-Homoserine lactone （5 mg）N-[（3S）-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-pentadec*； C15-HSL； N-pentadecanoyl-L-Homoserine lactone
（E）-C-HDMAPP （ammonium salt） （5 mg）P’-[（3E）-5-hydroxy-4-methyl-3-penten-1-yl]-isohypophosphoric acid， triammonium salt； （E）-1-Hydroxy-2-Methylbut-2-enyl 4-Diphosphate （ammonium salt）； （E）-C-HDMAPP （ammonium salt）
PP2 （10 mg）3-（4-chlorophenyl）-1-（1，1-dimethylethyl）-1H-pyrazolo[3，4-d]pyrimidin-4-amine； AGL 1879； PP2
Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate （5 mg）2S-ammonio-3R-hydroxy-5-（（2-oxo-2H-chromen-7-yl）oxy）pentyl hydrogen phosphate； S1P Lyase Fluorogenic Substrate； Sphingosine-1-Phosphate Lyase Fluorogenic Substrate
CB-86 （10 mg）N-cyclopropyl-8-[3-（1，1-dimethylheptyl）-5-hydroxyphenoxy]-oct*； CB-86
Iso-Olomoucine （25 mg）2-[[7-methyl-6-[（phenylmethyl）amino]-7H-purin-2-yl]amino]-ethanol； Iso-Olomoucine
tetranor-PGJM （25 ug）8-（（1R，2S）-2-（2-carboxyethyl）-5-oxocyclopent-3-en-1-yl）-6-oxooctanoic acid； tetranor-PGJ Metabolite； tetranor-PGJM
（+）-Warfarin （5 mg）4-hydroxy-3-[（1R）-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one； （R）-Warfarin； （+）-Warfarin
（S）-Lisofylline （25 mg）3，7-dihydro-1-[5S-hydroxyhexyl]-3，7-dimethyl-1H-purine-2，6-dione； （+）-Lisofylline|（S）-LSF； （S）-Lisofylline
IWR-1-endo （5 mg）4-[（3aR，4S，7R，7aS）-1，3，3a，4，7，7a-hexahydro-1，3-dioxo-4，7-methano-2H-isoindol-2-yl]-N-8-quinolinyl-benzamide； IWR-1-endo
動物種屬鑒定 PCR Mix 5    100 次
動物種屬鑒定 PCR Mix 6    100 次