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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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            人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2價(jià)格

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-05 09:18:19瀏覽次數(shù):769次

            聯(lián)系我時(shí),請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2價(jià)格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2價(jià)格質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

            人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2價(jià)格操作步驟:

            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
            細(xì)胞名稱
            形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  該細(xì)胞系來源于一男性胎兒的心臟組織,2009年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%FBS
            傳代方法  1:2傳代;3-4天一次
            傳代情況 P2
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 熒光法(-)
            STR  -
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 A類
            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

            RNA  DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )    10mL
            RNA  DTT ( 二硫代蘇糖 )    10g
            RNA  EDTA·2Na ( 乙二胺四乙酸二鈉 )    100g
            RNA  Guanidium HCl ( 鹽酸胍 )    100g
            RNA  GuSCN( 異硫氰酸胍 )    100g
            RNA  Oligo(dT) 纖維素    25mg
            RNA  PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)     100g
            RNA  Sarkosyl( 月桂酰 -N- 甲基氨基乙酸鈉 )     100g
            RNA  SDS( 十二烷基硫酸鈉 )    100g
            RNA  Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )    100g
            RNA 溶解液    10mL
            RNA 洗脫液    10mL
            RNA 洗脫液    50mL
            RNA 長效保存液    1.5mL
            RNAi,RNA 干擾載體及基因片段等系列    2 μg
            RNase A 干粉    100mg5-Chloro-N-[4-(cyclohexylureidosulfonyl)phenethyl]-2-methoxybenzamide; Glyburide, N-p-[2-(5-Chloro-2-methoxybenzamido)ethyl]benzenesulfonyl-N’-cyclohexylureaGlibenclamide
            N-(4-((6,7-Dimethoxyquinolin-4-yl)oxy)phenyl)-N-(4-fluorophenyl)cyclopropane-1,1-dicarboxamideCarbozantinib
            POE (20) sorbitan monooleate, Polyethylene glycol sorbitan monooleate, Polyoxyethylenesorbitan monooleate, Polysorbate 80Tween 80, MegaPure Detergent, 10% Solution
            2-[(1,2-Dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene)methyl]-4-meth yl-1H-pyrrole-3-propanoic acidSU-5402
            2-(2-propylpyridin-4-yl)-4-(p-tolyl)thiazoleFatostatin
            N-(4-Chloro-3-trifluoromethyl-phenyl)-2-ethoxy-6-pentadecyl-benzamideHAT Activator, CTPB
            2-Amino-9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-tetrahydrofuranyl]-3,7-dihydropurine-6,8-dione; 8-Oxoguanosine8-Hydroxyguanosine
            (2E)-1-(6,7-Dimethoxy-3,4-dihydro-1H-isoquinolin-2-yl)-3-(1-methyl-2-phenyl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-3-yl)-propenone hydrochlorideSmad3 Inhibitor, SIS3
            (2S,3S,4S)-Carboxy-4-(1-methylethenKainic acid
            Sulfo-SANPAH; Sulfo SANPAH; N-Sulfosuccinimidyl-6-(4’-azido-2’nitrophenylamino) hexanoate; nitrophenyl azide sulfo NHS ester; Sulfo-NHS-6-(4’-azido-2’nitrophenylamino)- hexanoateSulfo-SANPAH
            2-Pyrimidinamine, N-[4-(4-ami-piperidinyl)-2-methoxyphenyl]-5-chloro-4-(1H-indol-3-ylAZD-3463
            Mambalgin-1Mambalgin-1
            N-[(3-hydroxyphenyl)methyl]-N’-[4-(4-pyridinyl)-2-thiazolyl ureaRKI-1447
            3,4’,5,7-Tetrahydroxyflavone, 3,5,7-Trihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one, RobigeninKaempferol
            RNase A 干粉    500mg
            RNase A 溶液,10mg/mL    1.5mL
            RNase A 溶液,2mg/mL    1.5mL
            RNase 抑制劑 ( 人源 )    2500U
            RNase 抑制劑 ( 人源 )    400U
            RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )    3000U
            RNase 抑制劑 ( 豬源 )    500U

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