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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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            人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2圖片

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-05 09:13:17瀏覽次數(shù):505次

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            人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
            細(xì)胞名稱 人胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2圖片
            形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  該細(xì)胞系來自一女性胎兒的正常腎組織。中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫于1986年建立。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)   10%FBS
            傳代方法  1:2傳代;3-4天一次
            傳代情況 P4
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 熒光法(-)
            STR 
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 A類
            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            OPD 干粉    25g
            Origami B 菌種    1mL
            Origami B(DE3) 菌種    1mL
            Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞     0.1mL×10
            Origami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞    0.1mL×10
            Origami(DE3) 菌種    1mL
            Origami(DE3)plysS 菌種    1mL
            OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞    10×100μL
            Orth 固定液    250 mL
            P- 硝基苯基磷酸膽堿    100mg
            p19miRNA 檢測試劑盒     50 次
            p19siRNA 結(jié)合蛋白     1000U
            Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉 )    100μL
            PAGE 膠長加樣槍頭    1盒
            PBS 緩沖液 ,10×    250mL
            PCNA 小鼠單抗    100 μLCiticoline (sodium salt) (100 mg)P’-[2-(trimethylammonio)ethyl] ester-cytidine 5’-(trihydrogen diphosphate)-inner, monosodium salt; Cytidine 5’-diphosphocholine|Flussorex|Gerolin|Logan|Neurotron|Sinkron; Citicoline (sodium salt)
            D-Luciferin (sodium salt) (50 mg)4,5-dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4S-thiazolecarboxylic acid, monosodium salt; D-Luciferin (sodium salt)
            CAY10677 (10 mg)5-(2-amino-5-pyrimidinyl)-N,N-diethyl-1-octyl-1H-indole-3-methanamine; Icmt Inhibitor 15; CAY10677
            R-848 (50 mg)4-amino-2-(ethoxymethyl)-α,α-dimethyl-1H-imidazo[4,5-c]quinoline-1-ethanol; Resiquimod|S 28463; R-848
            Aprepitant (10 mg)5-[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]ethoxy]-3-(4-fluorophenyl)-4-morpholinyl]methyl]-1,2-dihydro-3H-1,2,4-triazol-3-one; Emend|L-754,030|MK 869|ONO-7436; Aprepitant
            MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC (1 mg)N-(4-methoxy-1,4-dioxobutyl)-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-(4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)-L-valinamide; I 1270|MeOSuc-AAPV-AMC|Methoxy Succinyl-Ala-Ala-Pro-Val-AMC; MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC
            Furin Inhibitor I (500 ug)N2-(1-oxodecyl)-L-arginyl-L-valyl-N-[(1S)-4-[(aminoiminomethyl)amino]-1-(2-chloroacetyl)butyl]-L-lysinamide; Decanoyl-Arg-Val-Lys-Arg-CMK; Furin Inhibitor I
            β-Lapachone (25 mg)3,4-dihydro-2,2-dimethyl-2H-naphtho[1,2-b]pyran-5,6-dione; NSC 26326|SL 11001|ARQ 501|NSC 629749; β-Lapachone
            PCNA 小鼠單抗    1000 μL
            PCR Mix 染料    10mL
            PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒    5次
            PCR 法 DNA 探針地高標(biāo)記試劑盒    5次

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