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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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            人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2價(jià)格

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2017-01-05 09:14:50瀏覽次數(shù):589次

            聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)
            人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2價(jià)格售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2價(jià)格質(zhì)量保證:    
            我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

            人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-2價(jià)格操作步驟:

            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
            細(xì)胞名稱
            形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
            生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
            特征特性  該細(xì)胞系來源于一女性胚胎的肺組織。1986年中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
            傳代方法  1:2傳代;3-4天一次
            傳代情況 P17
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測(cè) 熒光法(-)
            STR  -
            同工酶 
            染色體 
            使用權(quán)限 A類
            細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
            1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
            二、細(xì)胞處理:
            1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
            2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
            對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

            PRMI1640 培養(yǎng)基    100mL
            PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )    100mL
            Protein A 磁珠    1mL
            Protein A 瓊脂糖    1mL
            Protein A+G 瓊脂糖    2mL
            Protein G 磁珠    1mL
            Protein G 瓊脂糖    1mL
            PstI    1000U
            PVDF 膜,0.45μm,13×20cm    1張
            PvuII    1000U
            Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制劑 / 抗氧化劑 )    5mg
            胚胎裂解液    1mL
            硼氫化氰鈉    5g
            硼酸    500g
            偏釩酸鈉    25g
            嘌呤霉素干粉    25mgOleanolic Acid (100 mg)Astrantiagenin C|Caryophyllin|Giganteumgenin C|Gledigenin 1|NSC 114945|Oleanoic Acid|Virgaureagenin B; 3β-hydroxy-olean-12-en-28-oic acid
            (±)8-HEPE (250 ug)(±)-8-hydroxy-5Z,9E,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)8-HEPE
            9(S)-HETE (100 ug)9S-hydroxy-5Z,7E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 9(S)-HETE
            FeTMPyP (50 mg)Fe(III)tetrakis (1-methyl-4-pyridyl) porphyrin pentachlorideporphyrin pentachloride; FeTMPyP
            Cisplatin (50 mg)CDDP|Cisplatinum|NSC 119875|cis-Diamminedichloroplatinum; (SP-4-2)-diamminedichloro-platinum
            Bromosporine (25 mg)ethyl (3-methyl-6-(4-methyl-3-(methylsulfonamido)phenyl)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-8-yl)carbamate
            Citalopram (hydrobromide) (500 mg)Bonitrile|Lu 10-171|Nitalapram|Prepram; 1-[3-(dimethylamino)propyl]-1-(4-fluorophenyl)-1,3-dihydro-5-isobenzofurancarbonitrile, monohydrobromide
            Pyrazolam (5 mg)8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepine
            Ivacaftor (5 mg)Kalydeco|VX 770; N-
            BAY-85-3934 (1 mg)Molidustat; 1,2-dihydro-2-[6-(4-morpholinyl)-4-pyrimidinyl]-4-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-3H-pyrazol-3-one
            YZ9 (5 mg)7-hydroxycoumarin-3-Carboxylic Acid ethyl ester; 7-hydroxy-2-ozo-2H-1-benzopyran-3-carboxylic acid, ethyl ester
            嘌呤霉素鹽酸鹽    25mg
            平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子    5mL
            平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子 ( 不含血清 )    5mL
            蘋果酸脫氫酶    5ku
            葡激酶    100μg
            葡聚糖    50g
            葡聚糖 T-10    10g
            葡聚糖 T-2000    10g

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