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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>ATCC細(xì)胞>> 小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8F10圖片
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-23 13:44:40瀏覽次數(shù):350次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8F10圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8F10圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
[AsAbelisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[AsAb試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
[APAelisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[APA試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
[ANGAelisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[ANGA試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
[AhRelisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[AhR試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
[ADAM9elisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[ADAM9試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
[8-iso-PGF2αelisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[8-iso-PGF2α試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
人CD30分子試劑盒規(guī)格型號:96T/48T人CD30分子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人CD30分子試劑盒、人CD30分子elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
豬可溶性P選擇試劑盒規(guī)格型號:96T/48T豬可溶性P選擇試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬可溶性P選擇試劑盒、豬可溶性P選擇elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。
大鼠白三B4試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠白三B4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠白三B4試劑盒、大鼠白三B4 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個月。1mL 超快轉(zhuǎn)染試劑盒
PLPD 固定液 131290-250 250 mL
Oligo(dT) 再生溶液 130976-100 100mL
10x0.1mL 凝膠法內(nèi)毒素半定量試劑盒
1mL AD494(DE3) 菌種
100mg MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )
100 次 即用型易錯 PCR 試劑盒
MM4-64(FM®4-64) 22-0480-1 1mg
微型離心管研磨杵 ( 有離心管 ) 80603B-50 50 套
48 T 羥脯氨酸測試盒( 堿水解法 )( 測動物血清、組織、尿液 )
1套 玻璃勻漿器 ,10mL
50 次 植物 RNAout
200U ATP 依賴的 DNase
人粒細(xì)胞分離液 1.113 120908-200 200mL
中提柱式 BAC DNAout 90608-5 5次
200mL 人白細(xì)胞分離液 1.078
10g 次(亞)甲基蘭
50 次 細(xì)菌 DNAout
200mL 小鼠 NK 細(xì)胞分離液 1.076
堿性磷酸酶測試劑盒 18-0410-48 48 T
DNA 上樣液 ( 紅 ),6× 3690A-10 10mL
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