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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A說明書

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-23 14:14:41瀏覽次數(shù):384次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A說明書售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A說明書【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。籆HO-HCV-NS5A說明書
            形態(tài)特性  上皮細胞樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  CHO-HCV-NS5A細胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因,能穩(wěn)定表達NS5A蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國家重點實驗室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。 
            培養(yǎng)條件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
            傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
            傳代情況 C19
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 陰性
            STR 
            同工酶 同工酶鑒定
            染色體 
            使用權(quán)限 A類

            細胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
            1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細胞處理:
            1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
            2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            天門冬氨酸洛美沙星    分子式:    484.453    分子量:     C17H19F2N3O3.C4    英文名稱:    Lomefloxacin aspartate    CAS號:    211690-33-4    
             雙酚AF    分子式:    336.23    分子量:     C15H10F6O2    英文名稱:    Bisphenol AF    CAS號:    1478-61-1    
             溴甲酚綠    分子式:    698.01    分子量:     C21H14Br4O5S    英文名稱:    Bromocresol green    CAS號:    76-60-8    
             酚酞    分子式:    318.33    分子量:     C20H14O4    英文名稱:    Phenolphthalein    CAS號:    77-09-8-    
             分散橙 1    分子式:    318.33    分子量:     C18H14N4O2    英文名稱:    Disperse orange 1    CAS號:    2581-69-3    
             堿性品紅    分子式:    337.85    分子量:     C20H20ClN3    英文名稱:    Fuchsin    CAS號:    632-99-5    
             二十八酸    分子式:    424.74    分子量:     C28H56O2    英文名稱:    Twenty-eight acid    CAS號:    506-48-9    
             2,3-二氯丙烯    分子式:    110.97    分子量:     C3H4Cl2    英文名稱:    2,3- two chloride    CAS號:    78-88-6    
             己烷雌酚    分子式:    270.37    分子量:     C18H22O2    英文名稱:    Hexoestrol    CAS號:    84-16-2    
             環(huán)黃芪醇    分子式:    490.71    分子量:     C30H50O5    英文名稱:    Ring of Astragalus    CAS號:    84605-18-5    
             曲安西龍    分子式:    434.5    分子量:     C24H31FO6    英文名稱:    Qu Anxilong    CAS號:    124-94-7    
             加巴噴丁鹽酸鹽    分子式:    207.7    分子量:     C9H18ClNO2    英文名稱:    Gabapentin hydrochloride    CAS號:    60142-96-3  人白細胞分離液 1.078    120906-200    200mL
            柱式酵母質(zhì)粒 DNAout    70202-50    50 次
            250U    熱啟動 Tth DNA 聚合酶    
            50 次    磁珠血液 DNAout    
            30 次    一管式 DNA 膠回收試劑盒    
            200mL    小鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.071    
            活性氧檢測試劑盒    18-0380-100    100 次
            RNA 電泳液 ,10×    3150-100    100mL
            100μL    山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記    
            100g    DNA  Guanidine HCl( 鹽酸胍 )    
            250mL    非凍型細 RNA 保存液    
            1mL    TG1 種    
            Therminator II DNA 聚合酶    131196-100    100U
            電泳甘油    90503-100    100mL
            200U    T4 DNA 連接酶    
            1mL    蛋白磷酸酶抑制劑混合液 2    
            0.1mL×10    HB101 化學(xué)感受態(tài)細胞    
            1000μL    小鼠抗 V5 標簽單抗    
            Xa 因子蛋白酶    120507-25    25μg
            dATP 溶液,100mM    120615-0.5    0.5mL
            500g    鐵氰化      

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