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            中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克?。?;CHO-K1說明書

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-23 09:31:47瀏覽次數(shù):643次

            聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
            中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克?。?;CHO-K1說明書售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1說明書【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細胞名稱 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1說明書
            形態(tài)特性  上皮樣
            生長特性 貼壁生長
            特征特性  1957年,Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細胞,CHO-K1是CHO的一個亞克隆。CHO-K1的生長需要脯氨酸。 
            培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
            傳代方法  1:3傳代;3-4天一次
            傳代情況 PN3
            凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            支原體檢測 熒光法(-)
            STR  -
            同工酶 
            染色體  20-26
            使用權(quán)限 A類

            中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1說明書細胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
            1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細胞處理:
            1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
            2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
            中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1說明書質(zhì)量保證:    
            我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
            中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1說明書操作步驟:
            1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

            100mg    堿性磷酸酶標記親和素    
            100g    檸檬酸,二水    
            1000μL    山羊抗兔 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記    
            肌球蛋白    CAS100684-32-0    100mg
            小鼠抗 c-Myc 標簽單抗    130575-100    100μL
            250mg    直鏈淀粉    
            10g    L- 苯丙氨酸    
            250g    麥芽浸粉    
            10×100μL    T1 感受態(tài)細胞    
            丙烯葡聚糖凝膠 S-100 HR    CAS65546-95-4    150mL
            亞氨二介質(zhì)    131059-10    10mL
            50 次    柱式血清血漿 RNAout    
            25g    硫柳汞    
            100g    瓊脂糖    
            1000 支    1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝帶芯 )    
            兔肌動蛋白    CAS51005-14-2    1mg
            組蛋白 3.1 小鼠單抗    130571-1000    1000μL
            非凍型血液 RNA 保存液    111202-100    100mL
            1 g    糜蛋白酶原    
            5g    3- 苯甲酰丙酸    
            5mL    滑膜細胞生長因子    
            100mg    5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)    
            人基因組 DNA 混合液    131034-100    100μg
            分子雜交爐    120930-1    1臺
             直接紅81    分子式:    675.6    分子量:     C29H19N5Na2O8S2    英文名稱:    Direct red 81    CAS號:    2610/11/9    
             日落黃    分子式:    452.37    分子量:     C16H10N2Na2O7S2    英文名稱:    Sunset yellow    CAS號:    2783-94-0    
             酸性嫩黃G    分子式:    380.35    分子量:     C16H13N4NaO4S    英文名稱:    Acid yellow G    CAS號:    6359-82-6    
             (3-BroMophenyl)(2,4,6-triMethylphenyl)iodoniuM triflate    分子式:    551.2    分子量:     C16H15BrF3IO3S    英文名稱:    (3-BroMophenyl) (2,4,6-triMethylphenyl) triflate iodoniuM    CAS號:    1203709-76-5    
             4-(3-三氟甲基)哌啶鹽酸鹽    分子式:    265.7    分子量:     C12H15ClF3N    英文名稱:    4- (3- three trifluoromethyl phenyl) piperidine hydrochloride    CAS號:    6652-16-0    
             L-纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽    分子式:    173.25    分子量:     C9H19NO2    英文名稱:    L- l-norvaline tert butyl ester hydrochloride    CAS號:    13211-31-9    
             溴百里香酚蘭    分子式:    624.38    分子量:     C27H28Br2O5S    英文名稱:    Bromothymol blue    CAS號:    76-59-5    
            中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1說明書蘇丹Ⅳ    分子式:    380.44    分子量:     C24H20N4O    英文名稱:    Su Dan    CAS號:    85-83-6    
             酸性紫7    分子式:    566.47    分子量:     C20H16N4Na2O9S2    英文名稱:    Acid violet 7    CAS號:    4321-69-1    
             氯酚紅    分子式:    423.27    分子量:     C19H12Cl2O5S    英文名稱:    Chlorophenol red    CAS號:    4430-20-0    

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