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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            中國倉鼠卵巢細胞;CHO-rFVIII-11說明書

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號

            品       牌ATCC

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2017-01-23 09:18:54瀏覽次數(shù):414次

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            中國倉鼠卵巢細胞;CHO-rFVIII-11說明書售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

            中國倉鼠卵巢細胞;CHO-rFVIII-11說明書【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

            細胞名稱中國倉鼠卵巢細胞;CHO-rFVIII-11說明書
            形態(tài)特性  淋巴母細胞樣
            生長特性 懸浮生長
            特征特性  該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
            培養(yǎng)條件   10%FBS
            傳代方法  無
            傳代情況 1:3傳代,3-4天傳1次
            凍存條件  C5
            支原體檢測 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
            STR  陰性
            同工酶 
            染色體  未做

            細胞培養(yǎng)步驟:
            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
            1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
            2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
            3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            二、細胞處理:
            1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
            2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
            對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
            1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
            2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
            3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
            4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
            方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
            3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
            質(zhì)量保證:    
            我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
            操作步驟:
            1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
            2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

             堿性藍11    分子式:    458.05    分子量:     C29H32N3.Cl    英文名稱:    Basic Blue 11    CAS號:    2185-86-6    
            二乙酸熒光素(FDA)    分子式:    416.38    分子量:     C24H16O7    英文名稱:    Two acetic acid fluorescein (FDA)    CAS號:    596-09-8    
             4-(二乙氨基)    分子式:    193.24    分子量:     C11H15NO2    英文名稱:    4- (Er Yi) water Yang aldehyde    CAS號:    17754-90-4    
             (R)-alpha-Methylaspartic acid-4-tert-butyl ester    分子式:    203    分子量:     C9H17NO4    英文名稱:    (R) acid-4-tert-butyl ester -alpha-Methylaspartic    CAS號:    1231709-25-3    
             D-果糖-1-磷酸鋇鹽    分子式:    395.45    分子量:     C6H11BaO9P    英文名稱:    D- fructose -1- phosphate    CAS號:    7865    
             聚偏氯乙烯膠乳    分子式:     C6H8N3O2R    分子量:        英文名稱:    Polyvinyl chloride latex    CAS號:        
             勞氏紫    分子式:    263.7459    分子量:     C12H10ClN3S    英文名稱:    Thionine    CAS號:    581-64-6    
             孔雀石綠    分子式:    927.01    分子量:     C52H54N4O12    英文名稱:    Malachite green    CAS號:    2437-29-8    
             Ε酸(1-萘酚-3,8-二磺酸納)    分子式:    348.26    分子量:     C10H6Na2O7S2    英文名稱:    Epsilon acid (1- two -3,8- naphthol sulfonic acid sodium)    CAS號:    83732-80-3    
             芽孢染色液    分子式:        分子量:        英文名稱:    Spore staining solution    CAS號:    67ykh    
             α-甲基丙烯酸    分子式:    86.09    分子量:     C4H6O2    英文名稱:    Alpha methyl acrylic acid    CAS號:    79-41-4    
             環(huán)丁砜    分子式:    120.17    分子量:     C4H8O2S    英文名稱:    Sulfolane    CAS號:    126-33-0 100mL    RIPA 裂解液 ( 中 )    
            20μL    COX IV 兔單抗    
            0.5mL    dNTP 溶液,2.5mM    
            1個    0.5mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)    
            Illumina 高通量 DNA 測序    D007-1    1次
            Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞    130560-10    0.1mL×10
            100μL    小鼠抗 T7 標簽單抗    
            25g    甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷    
            100mL    三氟    
            1000 支    200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝 )    
            10 管    穿刺培養(yǎng)基    
            Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )    23-0240-100    100μL
            柱式腐殖酸清除劑    60801-100    100 次
            20L    SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )    
            100 次    dNTP 和引物清除劑    
            20 次    包涵體微量純化試劑盒    
            50 次    植物葉綠體蛋白提取試劑盒    
            固藍 BB 鹽    CAS5486-84-0    5g
            包涵體大量純化試劑盒    90510-2    2次
            20L    長效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)    
            50 次    兩管式 RT-PCR 試劑盒 (MMLV-Taq)      

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