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GTP 溶液,2.5mM2mL*使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數的 PCR(循環(huán)數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。
GTP 溶液,2.5mM2mL*產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
產品介紹:
規(guī)格及成分:
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA Kit
大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHRP) ELISA Kit
大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA Kit
大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA Kit中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
NCI-H2227(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2
大鼠角膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
奇異變形桿菌 Proteus mirabilis
凍膠假絲酵母 Candida gelida
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
Sf-9(昆蟲細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
根瘤菌
U251人膠質瘤細胞
日本根霉 Rhizopus japonicus
直喙鐮孢
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
HEp-2(人喉表皮樣細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌 Lactococcus lactis
苜蓿中華根瘤菌
SF767(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG ELISA Kit
大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA Kit
大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA Kit
猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA Kit
雞生長激素(GH)ELISA Kit
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA Kit
人L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit
人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit
人白介素13(IL-13)ELISA Kit
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