DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品詳細介紹：

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISAKit     6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%   

兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit     6-Aminoindazole  6967-12-0  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%   

兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒     6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S  度：98.0%   

兔子C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒     6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  90-51-7  中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S 

兔子C反應蛋白(CRP)ELISAKit     9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲)芴  分子式：C27H24N2
1-(三氟乙酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%)  1-(Trifluoroacetyl)imidazole  質(zhì)量規(guī)格：用于GC衍生化,≥98.5% 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA檢測試劑盒ratEndothelin1,ET-1ELISAKit 96T/48T

2,3-二丙酰胺(98%)  2,3-Dibromopropionamide  質(zhì)量規(guī)格：0.98 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)試劑盒 Human ETFB ELISA Kit

(800目)  Talc  質(zhì)量規(guī)格：800目 RatneuropeptideY,NP-YELISAKit大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(藥用級,325目)  Talc  質(zhì)量規(guī)格：藥用級,325目 EDTA三血液抗凝液100毫升

硼砂pH標準物質(zhì)(硼砂PH(25℃)：9.18)  pH standard－Borax  質(zhì)量規(guī)格：硼砂PH(25℃)：9.18 Mousepyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISA試劑盒小鼠同酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-苯氧芐(98%)  3-Phenoxybenzyl alcohol  質(zhì)量規(guī)格：0.98 小鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒

果膠(半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %)  Pectin  質(zhì)量規(guī)格：半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 % Rat connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒

三丁酯(AR,99%)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：AR,99% Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit 人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

三丁酯(CP)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：CP HumanAdenovirusAigen,ADV-AgELISA試劑盒人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三丁酯(標準品)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 直接細胞克隆兩步法逆轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒100
DNA Marker J(150～1500bp)組織LYNA激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細胞LYNA激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

組織LCK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細胞LCK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

組織JAK3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))