DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔鉤端螺旋體IgGelisa試劑盒   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔鉤端螺旋體IgG試劑盒、兔鉤端螺旋體IgG elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3  度：98.0%

兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISAKit     6-Benzyloxyindole  15903-94-3  中文名：6-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO 

兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名：  分子式：C10H16N2O6S3 

兔睪(rabbit TESTO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  151103-08-1  中文名：  分子式：C8H6F2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔干細(xì)胞因子(rabbit SCF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Chlorotestosterone acetate  855-19-6  中文名：醋酸氯  分子式：C21H29ClO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
十二烷基硫酸鋰  Lithium Dodecyl Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級 MousesubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫代甜菜堿 8  Sulfobetaine 8  質(zhì)量規(guī)格：>98%,sigma分裝 小鼠顆粒酶B(GZMB)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMB ELISA Kit

硫代甜菜堿 10  Sulfobetaine 10  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA檢測試劑盒Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 96T/48T

硫代甜菜堿 12  Sulfobetaine 12,SDDAB  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙?；D(zhuǎn)移酶(AANAT)試劑盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit

恩他卡朋;COMT抑制劑  Entacapone  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 英文名稱RatLBPELISAKit大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)規(guī)格：96T/48T

曲拉通X-114  Triton X-114  質(zhì)量規(guī)格：BC 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

曲拉通X-405  Triton X-405  質(zhì)量規(guī)格：70% in H2O ELISAKitFree-T3人游離三甲狀腺原規(guī)格：48T/96T

CHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸  CHAPS  質(zhì)量規(guī)格：>98.5% 小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 ，英文名： Gzms-A ELISA Kit

CHAPSO；3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸  CHAPSO  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級； 大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA檢測試劑盒RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T

二硫赤蘚(DTE)；1,4-二硫代赤蘚  1,4-Dithioerythritol   質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分sigma 人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)試劑盒 Human Protein Kinase C beta II,PKC-bII ELISA Kit
Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM組織C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

組織B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

組織AMPK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))