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            上海谷研實業(yè)有限公司
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            15026555973

            一氧化氮檢測探針

            參  考  價面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準

            產(chǎn)品型號100T

            品       牌R&D/美國

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時間:2022-04-22 12:30:07瀏覽次數(shù):434次

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            供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10233
            應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
            一氧化氮檢測探針公司正*的各種產(chǎn)品細胞組織B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測試劑盒
            組織樣品組織B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測試劑盒
            血液組織B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測試劑盒
            體液組織B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測試劑盒
            細胞組織D(CATHEPSIN D)活性熒光定量檢測試劑盒

            下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

            中文名稱

            英文名稱

            產(chǎn)品規(guī)格

            貨號

            一氧化氮檢測探針

            DAF-FM DA   Solution (5mM in DMSO)

            100T

            GOY-F10233

            產(chǎn)品詳細介紹:

            本品為溶解于DMSO的淡黃色溶液,濃度為5mM。本品適用于檢測細胞內(nèi)的一氧化氮水平,推薦工作濃度為1-10μM。如果收集細胞后再裝載探針,通常至少可以檢測100個樣品。

            DAF-FM DA4-Amino-5-Methylamino-2,7-Difluorofluorescein   Diacetate,也稱DAF-FM Diacetate,是新一代用于一氧化氮(nitric oxide, NO)定量檢測的探針,其檢測原理為:DAF-FM DA可以穿過活細胞膜(cell-permeable),進入細胞后可以被胞漿內(nèi)的酯酶催化形成不能穿過細胞膜的DAF-FMDAF-FM本身僅有很弱的熒光,光量子約0.005,但在與NO反應(yīng)后生成熒光素-苯駢三氮唑(benzotriazole),發(fā)強烈綠色熒光,光量子約0.81。Ex~495nmEm~515nm。任何可以檢測熒光素(fluorescein)的儀器,包括熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、熒光分光光度計或熒光酶標儀都可以用于該熒光探針的檢測。

            DAF-FM DA是新一代NO檢測探針,與以往成功且應(yīng)用廣泛的一氧化氮熒光檢測探針DAF-2 Diacetate相比較,具有多方面的改進:1DAF-FM DANO加合反應(yīng)形成的熒光產(chǎn)物在pH5.5以上不受pH影響;2DAF-FM DANO加合反應(yīng)形成的產(chǎn)物熒光更加穩(wěn)定,不容易淬滅,這樣更加便于檢測;3DAF-FM DA對一氧化氮的檢測靈敏度更高,其低檢測濃度可達到3nM,而DAF-2 Diacetate的低檢測濃度約為5nM。

            CAS254109-22-3

            分子式:C25H18F2N2O7

            分子量:496.42

            純度:>98%

            儲存條件:-20℃避光,有效期12個月

            DNA提取流程圖:

            QQ截圖20220414142532.png

            實驗步驟
            (1)
            實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
            (2)
            取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
            (3)65
            水浴3-10 min,期間混勻2-3
            (4)
            加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
            (5)
            取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
            (6)
            加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
            (7)10,000rpm,4
            離心20min
            (8)
            棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
            (9)
            ::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
            (10)
            2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
            (11)12,000rpm,4
            離心20 min
            (12)
            棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
            (13)
            200ulDEPC處理水溶解
            (14)
            用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
            (
            在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
            操作步驟:
            1.
            勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅
            b.
            單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
            c
            .細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
            2
            .將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
            3
            .可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
            5.
            每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
            6. 2-8
            10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
            7.
            把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
            8. 2-8
            10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
            人組織蛋白去乙酰化酶elisa試劑盒   人組織蛋白去乙?;冈噭┖?/span>   規(guī)格型號:96T/48T   人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白去乙?;冈噭┖?、人組織蛋白去乙?;?/span>elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene  24352-51-0  中文名:  分子式:C28H42  度:%  關(guān)鍵詞:  麥角甾烷; 對照品; 標準品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

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            人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒   人組織蛋白酶抗體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人組織蛋白酶抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶抗體試劑盒、人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene  24352-51-0  中文名:  分子式:C28H42 

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