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            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15026555973

            當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>探針標(biāo)記及檢測(cè)>> 1mgFluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)

            Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)

            參  考  價(jià)面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            產(chǎn)品型號(hào)1mg

            品       牌R&D/美國(guó)

            廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

            所  在  地上海市

            更新時(shí)間:2022-04-22 11:09:52瀏覽次數(shù):424次

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            供貨周期 現(xiàn)貨 貨號(hào) GOY-F10179
            應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
            Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)公司正*的各種產(chǎn)品細(xì)胞半胱-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
            組織半胱-9(CASPASE-9)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
            細(xì)胞半胱-10(CASPASE-10)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
            組織半胱-10(CASPASE-10)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
            細(xì)胞半胱-10(CASPASE-10)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

            DNA提取流程圖:

            QQ截圖20220414142532.png

            下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研

            中文名稱

            英文名稱

            產(chǎn)品規(guī)格

            貨號(hào)

            Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)

            Fluo-2, AM

            1mg

            GOY-F10179

            產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

            Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士發(fā)明的鈣離子指示劑Fluo 系列之一,目前,Fluo-3 Fluo-4 已成熟商品化。然而,Fluo-2 在細(xì)胞內(nèi)比Fluo-4 要更明亮,主要可能是由于大部分細(xì)胞對(duì)FLuo-2 的加載能力要高于FLuo-4。

            Fluo-3 成像涉及到鈣離子信號(hào)通路的多個(gè)方面,Fluo-3 經(jīng)常應(yīng)用在流式細(xì)胞術(shù)上,如螯合劑光活化、第二信使、神經(jīng)遞質(zhì)以及細(xì)胞水平的藥理篩選。Fluo-3 在這些應(yīng)用里之所以能大量運(yùn)用主要是由于其幾個(gè)重要特性:Fluo-3 可以被氬離子激光器488nm 激發(fā),并在與Ca2+結(jié)合后,發(fā)射熒光很明亮的熒光信號(hào)。Fluo-4 Fluo-3 以兩個(gè)氟原子取代氯原子的類似物,這一微小的結(jié)構(gòu)變化使得Fluo-4探針在488nm 激發(fā)光下的熒光信號(hào)得到增強(qiáng),信號(hào)穩(wěn)定持續(xù),可以應(yīng)用于共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀、微孔板讀數(shù)儀。

            Fluo-2、Fluo-3 Fluo-4 在與Ca2+結(jié)合后熒光增強(qiáng),與紫外激發(fā)的探針fura-2 indo-1 不同,不會(huì)發(fā)生光譜漂移。熒光光密度在與Ca2+結(jié)合后,增強(qiáng)至少100 倍。

            儲(chǔ)存:-20℃,避光,有效期12個(gè)月。

             

            操作步驟:
            1.
            勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅
            b.
            單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
            c
            .細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
            2
            .將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
            3
            .可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
            5.
            每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
            6. 2-8
            10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
            7.
            把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
            8. 2-8
            10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
            兔干擾素-β(rabbit IFN-β)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Benzyl D-glutamate  中文名:D-5-苯甲酯  分子式:C12H15NO4  度:98.0%

            兔干擾素-r(rabbit IFN-r)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     5-Benzyl D-glutamate  中文名:D-5-苯甲酯  分子式:C12H15NO4 

            兔干擾素-a(rabbit IFN-a)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-Benzyl L-glutamate  1676-73-9  中文名:L-5-芐酯  分子式:C12H15NO4 

            兔肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(rabbit HGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-74-6  中文名:  分子式:C18H27N3O4 

            兔分泌型球蛋白Aelisa試劑盒   兔分泌型球蛋白A試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔分泌型球蛋白A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔分泌型球蛋白A試劑盒、兔分泌型球蛋白A elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3
            N-
            硝基-L-精甲酯  N'-Nitro-L-arginine-methyl ester   質(zhì)量規(guī)格:>98% Ratphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            N-苯甲酰-L-酪乙酯(BTEE)  N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  質(zhì)量規(guī)格:>98% GPDGP(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

            AEBSF絲抑制劑  AEBSF HCl  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseSubstanceP,SPELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

            AEBSF(進(jìn)分)  AEBSF HCl  質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分TCI A2215 小鼠顆粒酶A(GZMA)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMA ELISA Kit

            鹽酸貝他定(進(jìn)口)  Bestatin HCl  質(zhì)量規(guī)格:≥98%,美國(guó)進(jìn)口 人芳香烴受體(AhR)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 96T/48T

            鄰菲啰啉鹽酸鹽,一水  1,10-Phenanthroline  monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit

            膦酰二肽鈉  Phosphoramidon di salt  質(zhì)量規(guī)格:0.99 英文名稱RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)規(guī)格:96T/48T

            癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷  Decyl β-D-glucopyranoside   質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

            德羅特韋(GSK-1349572,DTG)  Dolutegravir,GSK1349572  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitfPSA人游離前列腺特異性抗原規(guī)格:48T/96T

            十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂?;咸烟?/span>  Dodecyl glucopyranoside  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 ,英文名: EMAb ELISA Kit
            Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR
            分析-鈣離子指示探針)細(xì)胞AMPK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

            組織PKC激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

            細(xì)胞PKC激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

            組織Src激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

            細(xì)胞Src激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

            實(shí)驗(yàn)步驟
            (1)
            實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
            (2)
            取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
            (3)65
            水浴3-10 min,期間混勻2-3
            (4)
            加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
            (5)
            取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
            (6)
            加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過(guò)夜)
            (7)10,000rpm,4
            離心20min
            (8)
            棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
            (9)
            ::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
            (10)
            2V體積的無(wú)水乙,-70冰箱沉淀30min以上
            (11)12,000rpm,4
            離心20 min
            (12)
            棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
            (13)
            200ulDEPC處理水溶解
            (14)
            用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
            (
            在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))


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