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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> NADH氧化酶(NOX)可見分光光度法測試盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-03-14 10:01:51瀏覽次數(shù):292次
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
貨號 | GOY-01S6335 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 產(chǎn)品僅用于科研 |
產(chǎn)品名稱:NADH氧化酶(NOX)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號:GOY-01S6335
分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:
NOX(EC 1.6.99.3)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,可在氧氣存在下,直接將NADH氧化為NAD。該酶不僅參與NAD的再生,而且與免疫反應密切相關。
測定原理:
NOX能夠?qū)?/span>NADH氧化為NAD,NADH的氧化與2,6二氯酚靛藍(DCPIP)的還原相偶聯(lián),藍色的DCPIP被還原為無色的DCPIP,在600nm下測定藍色DCPIP的還原速率計算出NADH氧化酶活性的大小。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
遺傳性失明相關蛋白AIPL1抗體 組織蛋白酶B抗體
免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體 組織蛋白酶A抗體
0酸化蛋白激酶AKT1抗體 組織胺H4受體抗體
乙醛脫氫酶2型抗體 組織胺H3受體抗體
γ-氨基醛脫氫酶抗體 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體(腦膜瘤表達抗原5)
大鼠白介素23(IL23)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素23(IL-23)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素23(IL-23)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素23(IL-23)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素23受體(IL23R)elisa檢測試劑盒
NADH氧化酶(NOX)可見分光光度法測試盒柱式血液 RNAout50 次 柱式植物 RNAout 2.050 次
大提柱式血液 RNAout5次 柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
液體 RNAout50 次 柱式植物 mtDNAout,測序級10 次
液體 RNAout250 次 柱式植物 DNAout50 次
柱式血清血漿 RNAout50 次 柱式真菌 RNAout50 次
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