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廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 10:45:28瀏覽次數(shù):155次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D3088 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Active Arylsulfatase F (ARSF) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 物種 | 貨號(hào) |
芳基硫酸酯酶F(ARSF)活性蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D3108 |
英文名稱(chēng):Active Arylsulfatase F (ARSF)
ASF
型號(hào):GOY-01D3108
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):6.9
應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)產(chǎn)品名稱(chēng):107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白物種:Mouse,小鼠INPP4; Inositol polyphosphate 4-phosphatase type I; Type I inositol 3,4-bisphosphate 4-phosphatase
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
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芳基硫酸酯酶F(ARSF)活性蛋白人人孕酮受體(PGR)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
人核因子κB抑制物激β(IKK-β)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
50T 流感病毒甲型H1N1 PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
大鼠絡(luò)(TYR)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
2 ug pHP13 pHP13 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pCAMBIA1304 pCAMBIA1304 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100mL 增強(qiáng)型DAB顯色試劑盒 Enhanced DAB Chromogenic Kit 4℃保存
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20次 Southern專(zhuān)用DNA Marker(DIG)
50mg 酐 ( 牛紅血球 ) Carbonic Anhydrase 4℃保存
人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
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