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            腫瘤細(xì)胞凍存保護(hù)劑

            時(shí)間:2017/6/20閱讀:821
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            腫瘤細(xì)胞很多化合物都可以作為凍存保護(hù)劑,它們既可以單獨(dú)使用也可以聯(lián)合使用,例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒(méi)有的準(zhǔn)則,但是大家普遍認(rèn)為二甲基亞砜(DMSO)和甘油是保護(hù)活細(xì)胞和組織使用zui廣泛且zui有效的凍存保護(hù)劑。其他凍存保護(hù)劑可根據(jù)情況使用,可單獨(dú)使用也可聯(lián)合使用,包括:聚乙烯乙二醇(polyethylene glycol),丙烯乙二醇(propylene  glycol),甘油(glycerine),聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidone),山梨醇(sorbitol),右旋糖苷(dextran),海藻糖(trehalose)。
            凍存組織和整個(gè)器官的需求,促進(jìn)了凍存方法的發(fā)展,新方法也提高了凍存腫瘤細(xì)胞和有機(jī)體的復(fù)蘇。這些方法包括改變凍存保護(hù)劑的濃度和加入添加劑,避免凍存過(guò)程引發(fā)的細(xì)胞調(diào)亡或 程序性死亡。多年來(lái)人們一直認(rèn)為,是凍存過(guò)程中產(chǎn)生的細(xì)胞內(nèi)物理變化或損壞,造成凍存后細(xì)胞的死亡。而zui近有研究發(fā)現(xiàn),一些更為精細(xì)的胞內(nèi)活動(dòng)可能導(dǎo)致了細(xì)胞死亡,而這些活動(dòng)可在一定程度上受控于適當(dāng)?shù)膬龃嫣砑觿?br />凍存過(guò)程中,凍存保護(hù)劑有多種功能。例如,DMSO 可以降低冰點(diǎn),促進(jìn)細(xì)胞在胞內(nèi)冰晶形成之前脫水更加*。普遍認(rèn)為,當(dāng)凍存保護(hù)劑可有效穿透細(xì)胞,延遲胞內(nèi)冰晶形成,降低溶液效應(yīng)時(shí),凍存保護(hù)的效果*。另外,需要根據(jù)凍存的細(xì)胞類型來(lái)選擇凍存保護(hù)劑。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),甘油是更好的選擇,因?yàn)樗亩拘员菵MSO 小。但是,DMSO 具有更好的滲透性, 通常作為較大型較復(fù)雜的細(xì)胞凍存,如原生生物。在添加到細(xì)胞懸液之前,凍存保護(hù)劑應(yīng)該用新鮮培養(yǎng)基稀釋到適宜濃度,這能zui小化潛在的化學(xué)反應(yīng)損害,并確保腫瘤細(xì)胞能均一接觸到保護(hù)劑,減少毒害效應(yīng)。DMSO 和甘油通常使用的濃度范圍為 5-10%(v/ v)。除了用于植物細(xì)胞,二者一般不聯(lián)合使用。

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