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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>兔食管上皮細(xì)胞培養(yǎng)步驟
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)材料:
1. 大兔的正常食管組織
2. 6孔培養(yǎng)板:用多聚賴氨酸4℃包被過(guò)夜
3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.4
4. 手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷
實(shí)驗(yàn)方法:
1. 處死大兔,取正常食管組織放入含雙抗的PBS(pH=7.2)中反復(fù)清洗3次,以洗去組織表面的血絲及粘液;
2. 小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離;
3. 分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS(pH=7.2)反復(fù)沖洗若干次;
4. 將清洗后食管黏膜組織剪成1mm3 左右大小的組織塊;
5. 再次用含雙抗的PBS(pH=7.2)反復(fù)清洗,直至清洗液清亮為止;
6. 將黏膜組織塊按1塊/cm2 的密度接種于6孔培養(yǎng)板中,上皮面朝下;
7. 將貼滿組織塊的培養(yǎng)板室溫放置5~10分鐘,待組織塊貼壁后,轉(zhuǎn)入37℃、5%CO2 的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
8. 靜置2h左右,待組織塊基本不會(huì)浮起后,加入0.5-1ml培養(yǎng)液,置于37℃、5%CO2 的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。3-4天后有上皮原代細(xì)胞從組織邊緣爬出,7天左右鋪滿板面。
人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit
人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit
人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit
人腎素(Renin)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Renin ELISA Kit
人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝 Human Estradiol receptor,ER ELISA Kit
原代細(xì)胞
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