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原代細(xì)胞嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干。不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套。有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測。水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動...
除非原代細(xì)胞產(chǎn)品說明書上另有特別說明,否則所有PeproTech蛋白產(chǎn)品都為凍干粉形式,在室溫下也能保持很好的穩(wěn)定性。但是,我們推薦凍干產(chǎn)品保存于-20℃。大多數(shù)凍干產(chǎn)品經(jīng)溶解和稀釋后,可短時(shí)間保存于...
原代細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于一196~C液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞...
原代細(xì)胞的選擇透過性:這種膜可以讓水分子自由通過,細(xì)胞要選擇吸收的離子和小分子(如:氨基酸、葡萄糖)也可以通過,而其它的離子、小分子和大分子(如:信使RNA、蛋白質(zhì)、核酸、蔗糖)則不能通過。膜蛋白:指...
zui常用的細(xì)胞系方法是檢測96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中蛋白的濃度;另外一個(gè)方法是讓細(xì)胞在軟瓊脂上生長形成集落,然后利用原位免疫沉淀技術(shù)獲得高產(chǎn)細(xì)胞。近年來,發(fā)展起來的高通量自動化篩選技術(shù)也被受關(guān)注。為實(shí)現(xiàn)克隆...
雖然細(xì)胞株DNA突變是物種進(jìn)化的原動力,但突變帶來的損傷也往往是危害極大的。因此,物種自身進(jìn)化出了保護(hù)自己不受基因突變帶來的損傷的修復(fù)機(jī)制。其中一類機(jī)制叫做“DNA錯配損傷修復(fù)”,它能夠改變由于基因在...
腫瘤細(xì)胞建立起線粒體這一細(xì)胞的發(fā)電所來增加氧化作用。線粒體大量生成氧自由基損害DNA,zui終造成了細(xì)胞周期阻滯。Sadek博士說:“我們發(fā)現(xiàn)了以往未知的一個(gè)介導(dǎo)心肌細(xì)胞周期阻滯的保護(hù)機(jī)制,其是因氧依...
細(xì)胞系培養(yǎng)板的加樣和操作:細(xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無菌的原則,各項(xiàng)操作要保證規(guī)范、科學(xué),不對細(xì)胞的生長造成額外的影響。這其中zui常見的問題就是如何保證加樣后細(xì)胞的均勻和盡量減少換液對細(xì)...
原代細(xì)胞是zui簡單的檢測細(xì)胞生長的方法。計(jì)數(shù)細(xì)胞一般利用臺盼藍(lán)(錐蟲藍(lán)染色,臺盼藍(lán)(錐蟲藍(lán))不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色。而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增高,可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使細(xì)胞著...
原代細(xì)胞在酶的作用下,由它再進(jìn)一步生成一組旁分泌激素物質(zhì),如血栓素和前列腺素等,這類物質(zhì)對調(diào)節(jié)血管口徑和通透性有明顯的作用,還能引起炎癥反應(yīng)和疼痛,并影響血液凝固。中性粒細(xì)胞內(nèi)含許多彌散分布的細(xì)小的淺...
傳統(tǒng)的原代細(xì)胞培養(yǎng)主要是通過顯微鏡下形態(tài)學(xué)變化以及傳代培養(yǎng)周期的變化預(yù)估細(xì)胞生長生存狀態(tài)。這種主觀判斷既無法量化,也無法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。因此,目前對細(xì)胞存活質(zhì)量的判斷并沒有準(zhǔn)確、客觀的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),并且對...
總結(jié)細(xì)胞株不貼壁可能原因如下:●胰蛋白酶消化過度●支原體污染●培養(yǎng)基pH值過堿(NaHCO3分解)●細(xì)胞老化●接種細(xì)胞起始濃度太低或太高解決方法:●縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度●分離培養(yǎng)物,...
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中正常機(jī)體的T淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中受到特異性抗原或有絲分裂原刺激??赊D(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。細(xì)胞免疫缺陷時(shí),患惡性腫瘤或某些其他疾病時(shí)。轉(zhuǎn)化率顯然降低。目前zui常用植物血凝素(PHA)作為...
細(xì)胞株實(shí)驗(yàn)室低溫保存設(shè)備包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀、低溫冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、藥品保存箱、疫苗保存箱、血庫冰箱、層析...
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)試劑1.細(xì)胞營養(yǎng)液(DMEM液體培養(yǎng)基,10%胎牛血清,雙抗100單位/ml),消化液(0.05%胰酶,0.53mMEDTA·Na),Hank’s液。2.2×HBS液(280mMNaCl,...
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