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            干貨 | 小分子化合物常見(jiàn)問(wèn)題解答

            閱讀:1568      發(fā)布時(shí)間:2023-12-13
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            Q1:收到化合物后如何處理?

             

            A1:收到化合物后若最近一段時(shí)間不使用,建議粉末狀態(tài)下-20℃儲(chǔ)存。正式實(shí)驗(yàn)時(shí),可提前一天按照說(shuō)明書(shū)的要求選擇合適的溶劑配制儲(chǔ)存液(不穩(wěn)定的化合物需現(xiàn)配現(xiàn)用),并于-20℃分裝保存,避免反復(fù)凍融造成的藥物使用效果不佳。

             

            Q2:按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求操作,化合物沒(méi)有溶解應(yīng)該如何處理?

             

            A2:一般情況下,按照說(shuō)明書(shū)推薦的溶解方式是可以溶解的,個(gè)別比較特殊的化合物不溶可以采取以下助溶措施:
            1)水浴加熱45℃以下,20-30min;
            2)超聲處理,15min左右。

             

            Q3:DMSO含量多少對(duì)細(xì)胞/動(dòng)物沒(méi)有損傷?

             

            A3:一般情況下,細(xì)胞(體外)實(shí)驗(yàn)要求DMSO的終濃度不超過(guò)0.1%;動(dòng)物(體內(nèi))實(shí)驗(yàn)中,若是正常鼠,DMSO的終濃度最好不超過(guò)10%,若是裸鼠或體弱鼠,DMSO的終濃度建議不超過(guò)2%。建議在實(shí)驗(yàn)中設(shè)置溶劑對(duì)照,排除DMSO對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的影響。

             

            Q4:化合物摩爾濃度如何計(jì)算?

             

            A4:愛(ài)必信→技術(shù)資源→產(chǎn)品資訊,參考軟文《細(xì)胞培養(yǎng)小分子藥物配制方法解析

            愛(ài)必信→技術(shù)資源→常用工具→摩爾濃度計(jì)算器

             

            Q5:動(dòng)物/細(xì)胞實(shí)驗(yàn)化合物如何稀釋?用什么溶劑稀釋?

             

            A5:一般情況下,化合物先溶于某一溶劑(如DMSO)配成儲(chǔ)存液,再用另一種溶劑(如PBS)進(jìn)行稀釋,不能將2種溶劑混合再去溶解。細(xì)胞(體外)實(shí)驗(yàn)可選擇培養(yǎng)基、生物緩沖液等進(jìn)行稀釋;動(dòng)物(體內(nèi))實(shí)驗(yàn)溶解方式以下方案僅供參考(現(xiàn)配現(xiàn)用,當(dāng)天使用):

            1)依序添加每種溶劑: 10% DMSO→90%(20% SBE-β-CD in saline)

            2)依序添加每種溶劑:10% DMSO→ 90% Corn Oil(建議實(shí)驗(yàn)周期半個(gè)月以內(nèi))

            3)依序添加每種溶劑: 10% DMSO →40% PEG300→5% Tween 80 →45% saline

            備注:以1mL工作液為例,取100μL澄清DMSO溶解的儲(chǔ)存液加到400μL PEG300中,混合均勻;再向上述體系中加入50μL Tween-80,混合均勻;然后再繼續(xù)加入450μL生理鹽水定容至1mL。

            生理鹽水的配制:將 0.9g氯化鈉,溶解于ddH?O并定容至100mL,可以得到澄清透明的生理鹽水溶液。

             

            Q6:化合物保存條件是什么,能保存多久?

             

            A6:一般情況下,粉末在-20℃儲(chǔ)存一年有效;溶解后分裝保存,避免反復(fù)凍融,-20℃儲(chǔ)存6個(gè)月有效,2-4℃保存兩周有效。對(duì)于不穩(wěn)定的化合物,需現(xiàn)配現(xiàn)用。

             

            Q7:說(shuō)明書(shū)沒(méi)有提到我購(gòu)買的化合物是否無(wú)菌,需要做滅菌處理嗎?如何滅菌?

             

            A7:愛(ài)必信小分子化合物都沒(méi)有做無(wú)菌處理,使用時(shí)需要除菌。若儲(chǔ)存液用DMSO溶解,因DMSO具有很強(qiáng)的殺菌能力,可認(rèn)為配制好的溶液即為無(wú)菌溶液。對(duì)于用其它溶劑(如水)溶解的化合物可用0.22μm濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌。避免使用紫外滅菌和高壓蒸汽滅菌,可能會(huì)破壞化合物的結(jié)構(gòu),影響其生物活性。

             

            Q8:為什么參考文獻(xiàn)或之前的實(shí)驗(yàn)濃度,對(duì)我的細(xì)胞沒(méi)有效果了?是化合物有問(wèn)題嗎?

             

            A8:小分子藥物的使用濃度受細(xì)胞種類,傳代次數(shù)、細(xì)胞通透性,孵育時(shí)間等多種因素的影響。不同實(shí)驗(yàn)作用效果不同、文獻(xiàn)只能作參考,不能作為標(biāo)準(zhǔn)。除參考文獻(xiàn)外,還需要做濃度梯度曲線確定最佳作用濃度。若之前用過(guò)這個(gè)化合物,已經(jīng)摸索最佳濃度,可以排查是不是由于化合物批次不同或保存不當(dāng)超過(guò)有效期引起的差異。

             

            Q9:配制的澄清儲(chǔ)存液,使用時(shí)從冰箱取出發(fā)現(xiàn)有沉淀,這個(gè)該怎么處理?

             

            A9:如果儲(chǔ)存液的濃度接近化合物溶解度,凍融會(huì)產(chǎn)生沉淀。這種沉淀是暫時(shí)的,當(dāng)溶液的溫度恢復(fù)到室溫時(shí)會(huì)溶解。如果沉淀溶解緩慢,可以適當(dāng)水浴加熱或超聲處理。

             

            Q10:是否可以使用小分子化合物作為分析標(biāo)準(zhǔn)品或者對(duì)照品?

             

            A10:貨號(hào)以abs8開(kāi)頭的小分子化合物適用于細(xì)胞/動(dòng)物實(shí)驗(yàn),不用作分析標(biāo)準(zhǔn)品或者對(duì)照品。標(biāo)注有標(biāo)準(zhǔn)品和貨號(hào)以abs4開(kāi)頭的植物提取物,可作為標(biāo)準(zhǔn)品使用。

             

            本期小愛(ài)推薦小分子激動(dòng)劑/抑制劑:



            貨號(hào)

            品名

            CAS號(hào)

            規(guī)格

            abs810001

            LY 294002(PI3K抑制劑)

            154447-36-6

            25mg

            abs810002

            SB 203580(p38 MAPK抑制劑)

            152121-47-6

            100mg

            abs810003

            U0126(MEK抑制劑)

            109511-58-2

            100mg

            abs810008

            SP600125(JNK抑制劑)

            129-56-6

            50mg

            abs810010

            PD 98059(MEK抑制劑)

            167869-21-8

            50mg

            abs810012

            Brefeldin A(蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑)

            20350-15-6

            25mg

            abs810013

            BAY 11-7082(IKK抑制劑)

            19542-67-7

            25mg

            abs810030

            Rapamycin(mTOR抑制劑)

            53123-88-9

            100mg

            abs810111

            MCC-950 sodium(NLRP3抑制劑)

            256373-96-3

            100mg

            abs810466

            Cisplatin(DNA烷化劑)

            15663-27-1

            50mg

            abs810575

            3-Methyladenine(自噬抑制劑)

            5142-23-4

            500mg

            abs810640

            Y-27632 2HCl(ROCK1抑制劑)

            129830-38-2

            5mg

            abs810744

            Erastin(鐵死亡誘導(dǎo)劑)

            571203-78-6

            50mg

            abs812852

            PMSF(蛋白酶抑制劑)

            329-98-6

            200mg

            abs812864

            Y-27632(ROCK1抑制劑)

            146986-50-7

            10mg

            abs812972

            Poly(I:C)(TLR3激動(dòng)劑)

            24939-03-5

            50mg

            abs813072

            Ferrostatin-1(鐵死亡抑制劑)

            347174-05-4

            50mg

            abs815889

            MOG (35-55)(EAE誘導(dǎo)劑)

            149635-73-4

            5mg

            abs817025

            Capsaicin (TRPV1激動(dòng)劑)

            404-86-4

            100mg

            abs817348

            IBMX(PDE抑制劑)

            28822-58-4

            100mg

            abs817874

            MG-132(蛋白酶抑制劑)

            133407-82-6

            5mg

            abs819421

            Prostaglandin E2(PGE2受體激活劑)

            363-24-6

            50mg

            abs822945

            Carperitide(內(nèi)皮素受體抑制劑)

            89213-87-6

            500μg




             

            好消息!Absin文獻(xiàn)獎(jiǎng)勵(lì)重磅升級(jí)!

             


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            WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...

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