口蹄疫病毒核酸PCR檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒；

 保存條件：避光 -20度 保存。

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口蹄疫病毒核酸PCR檢測(cè)試劑盒

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黑豆蚜用盆栽蠶豆（Vicia faba L.）苗飼養(yǎng)，溫度23 - 25℃，凈系周期16:8。
步驟實(shí)驗(yàn)

1。抗生素處理方法
將2周大蠶豆苗用蒸餾水沖洗干凈，凍做表面水分之后，將其根部浸泡喺濃度為0.2mg／ml嘅抗生素溶液中，24個(gè)鐘后接0日齡若蚜，2天后將所有蚜蟲(chóng)轉(zhuǎn)入正常植株飼養(yǎng).處理5日同10天后分別就取樣，食提dna.
2。dna抽提
將正常蚜蟲(chóng)同抗生素處理過(guò)嘅蚜蟲(chóng)于裂解緩沖液中勻漿，用蛋白酶k處理過(guò)夜之后，lv仿法進(jìn)行dna抽提按照常規(guī)嘅酚-。
3。引子設(shè)計(jì)同pcr反應(yīng)
利用shigenobu等報(bào)道嘅巴克納氏菌基因組中rrl總理（2000年）- aroe基因序列同primer 5.0軟件設(shè)計(jì)引子，從中撈取一對(duì)s:5’貓’GGC TCA TCA cct3 GCT同a:5’-事實(shí)上cct3 TTC CGT CTG CT嘅進(jìn)行pcr反應(yīng)，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為799bp.pcr反應(yīng)條件為：94℃變性2min之后進(jìn)行35循環(huán)個(gè)個(gè)循環(huán)為94℃變性30秒55℃退火30秒，，，，72℃延伸一分鐘。
4。電鏡觀察
選取處理7天后嘅正常蚜蟲(chóng)與及利福平處理過(guò)嘅蚜蟲(chóng)，經(jīng)戊二醛入墻液入墻后進(jìn)行電鏡切片觀察。