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諾如病毒GⅠ型核酸PCR檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
產品規(guī)格:50T/盒;
保存條件:避光 -20度 保存。
我司提供各種流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法),還有各種原料和質控品,隨時歡迎您的來電: 楊
諾如病毒GⅠ型核酸PCR檢測試劑盒
以下是我司提供的部分PCR產品
輪狀病毒A組核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
諾如病毒GⅠ型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
諾如病毒GⅡ型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
諾如病毒( GⅠ/GⅡ型)雙重核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
札如病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
星狀病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
札如病毒/星狀病毒雙重核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
腸道腺病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
登革熱病毒通用型核酸檢測試劑盒(熒光PCR) |
盒
我司還提供其它進口或國產試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。
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將條扮喺一個干凈嘅1.5ml離心理上,加15~30μl(具體決于預期嘅終產物濃度)嘅Elution Buffer(或者TE緩沖液)到柱基質上,室溫放置1min,13000xg離心1min以打DNA。*次打可以洗出70-80%嘅結合DNA。如果再打一次嘅話,可以將殘余嘅DNA打出嚟,不過噉嘅濃度就會較低。
2.鏈接反應(以Takara公司pMDTM18-T Simple Vector Kit為例)
1)喺微量離心理中配制下列DNA溶液全量為5μl。
pMDTM18-T Simple Vector 1μl
Insert DNA 0.1 pmol~0.3 pmol
dH2Oup to 5μl
2)加5μl(等量)嘅Solution I。
3)16℃反應半個鐘。(2 kbp以上長片段PCR產物進行DNA克隆時,鏈接反應時間請心命到數(shù)鐘)。
4)全量(10μl)加到100μl感受態(tài)細胞中,雪中放置半個鐘。
5)42℃加熱9個秒鐘之后,再喺雪中放置一分鐘。
6)加890μl LB培養(yǎng)基,37℃振蕩培養(yǎng)60分鐘。
7)喺含有X-Gal、IPTG、Amp嘅LB瓊脂平板培養(yǎng)基上培養(yǎng),形成單菌落。計數(shù)白色、藍菌落。
8)揀白色菌落,鑒定載體中插入片段嘅長度大小。
注意事項
1.使用新鮮嘅電泳緩沖液TAE Buffer。唔好重復使用,其PH嘅升高會少產量。
2.唔論采取何種方法回收DNA,喺回收過程中,要盡量少打體積嚟提高收得率同濃度,以方便后續(xù)用。
3.由膠上回收DNA時,應盡量縮短光照時間并采用長波長紫之外,燈(300-360nm),以少紫外光對DNA嘅切割。DNA曝露喺紫之外,燈下唔超過30秒。
4.鏈接反應時間系與溫度密切有關,因為反應速度隨溫度嘅提高而加快。通??刹捎?6℃鏈接4個鐘為宜,如系平四鏈接需要適當心命反應時間以提高鏈接效率;喺選擇反應嘅溫度與時間關系嘅時候,都要諗喺反應系統(tǒng)中其他因素嘅影響。
5.鏈接反應嘅成過程應注意槍頭嘅潔凈以逃過造成對酵素嘅污染,為防止酵素活性降低,攞酵素時應喺雪上用且動作快手。
6.鏈接反應應系25℃以下進行,溫度升高較難形成環(huán)狀DNA,影響鏈接效率。長片段PCR產物(2kb以上)進行鏈接嘅時候,鏈接反應時間應心命到數(shù)鐘。
7.進行克隆嘅時候,Vector DNA同Insert DNA嘅摩爾數(shù)過一般為1:2~10。根據(jù)實驗情況揀啱嘅摩爾數(shù)過。
8.用高效嘅感受態(tài)細胞(轉化效率≥1×108 cfu/μg pUC19),噉先可能得到比較理想嘅陽性克隆。