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            目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司>>細胞分類>>人肝癌細胞>> HepG2細胞HepG2人肝癌細胞/STR鑒定

            HepG2人肝癌細胞/STR鑒定
            • HepG2人肝癌細胞/STR鑒定
            • HepG2人肝癌細胞/STR鑒定
            參考價 1500
            訂貨量 ≥1
            具體成交價以合同協(xié)議為準
            1500
            ≥1
            具體成交價以合同協(xié)議為準
            • 品牌 Cellverse
            • 型號 HepG2細胞
            • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
            • 所在地 上海市
            屬性

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            >

            更新時間:2025-03-12 10:19:33瀏覽次數(shù):3360評價

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            純度 99% 供貨周期 一周
            規(guī)格 1*10^6 貨號 HepG2
            應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 科研用途
            HepG2人肝癌細胞/STR鑒定
            細胞介紹
            該細胞系來自15歲男性白人的組織。形態(tài)為上皮形,模式染色體數(shù)為55,在免疫抑制小鼠中不致瘤。

            HepG2人肝癌細胞/STR鑒定

            細胞介紹

            該細胞系來自15歲男性白人的組織。形態(tài)為上皮形,模式染色體數(shù)為55,在免疫抑制小鼠中不致瘤。

            細胞特性

            1) 來源:肝細胞癌

            2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長

            3) 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

            4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

            5)  用途:僅供科研使用。

            運輸和保存

            干冰運輸及復蘇好存活細胞

            (1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

            (2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

            細胞接收后的處理

            1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

            2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

            3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的wan全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

            4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的wan全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。

            HepG2人肝癌細胞/STR鑒定

            一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

            1) 準備MEM(推薦iCell-0012)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

            2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

            培養(yǎng)注意事項:1. hepg2細胞復蘇或傳代后會有少部分的細胞貼壁和部分懸浮的細胞,復蘇兩天后細胞會從貼壁細胞向外開始生長,有時細胞再生長過程中,細胞會再貼壁細胞的上方生長,形成不同的細胞層,這種情況會有發(fā)生。 在細胞復蘇的一周內(nèi),培養(yǎng)瓶中 通常會有懸浮的活的細胞團,在換液過程中不要丟棄在這些活的懸浮細胞,可以通過離心(125×g)回收細胞,重新打回到培養(yǎng)瓶中,分離或者丟棄漂浮的活細胞會使細胞數(shù)量變少,引起細胞的停滯生長或細胞死亡。

            2.培養(yǎng)條件的細微變化,尤其是pH和培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量,可能會影響細胞的生長狀況,在細胞的生長過程中會有細胞內(nèi)的液泡出現(xiàn),特別在細胞快要融合是會出現(xiàn)這種情況。培養(yǎng)細胞時使用未被滅活的高質(zhì)量、低內(nèi)毒素的胎牛血清,可以使細胞更好的貼壁和形成單層細胞。

            3. 細胞在生長過程中可以通過將血清濃度提到到20%來改善細胞生長緩慢的情況。(參考atcc 有關該細胞的描述)

            3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

            二. 細胞處理:

            1)凍存細胞的復蘇:

            將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mLwan全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,wan全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8mlwan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

            2) 細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

            該細胞為輕微貼壁和少量懸浮培養(yǎng)細胞,傳代可以參考以下方法:

            1. 收集:將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

            2. 加入0.25%(w / v)yi蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

            3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的wan全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

            3) 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

            下面T25瓶為例;

            1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

            2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

            3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

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