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| 供貨周期 | 一周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
詳細(xì)介紹
SmartBuffers®一步法快速蛋白染色液是已配制好可直接使用的蛋白凝膠電泳染色劑，速度快,靈敏度高, 安全無(wú)毒,效果好。該產(chǎn)品是真正的實(shí)現(xiàn)一步蛋白染色。只需簡(jiǎn)單的從電泳槽中取出凝膠、放入染色劑中，就可離開了。無(wú)需漂洗、微波加熱、固定或脫色。凝膠的蛋白條帶2分鐘內(nèi)即可見。凝膠可以無(wú)限期留在染色液中, 只有蛋白質(zhì)被染色，不會(huì)增加背景染色。
產(chǎn)品特色：
方便快捷-不用漂洗，不用加熱，不用脫色，不用固定，條帶 2 分鐘可見。
安全環(huán)保-不含任何腐蝕性的強(qiáng)酸（如：磷酸、鹽酸、乙酸等），不含任何對(duì)人體有害的甲醇和乙醇。
靈敏度高-檢測(cè)下限 2ng 蛋白。
兼容性好-適用于變性和非變性膠以及質(zhì)譜分析。
Order Information訂貨信息：
Art.No. 目錄編碼 | Product Name 產(chǎn)品名稱 | Product Description 產(chǎn)品描述 | Pack. 產(chǎn)品包裝 |
FBS-0125 | 一步法快速蛋白染色液 | 考馬斯亮藍(lán)染料、酸和增溶劑 | 125mL |
FBS-1000 | 1000mL |
存儲(chǔ)條件：
密封，室溫存儲(chǔ)，一年有效。
重要提醒：
1、在染色之前，不需要或不建議進(jìn)行多次清洗。
2、不需要也不建議在用前采取酒精/乙酸固定步驟。
3、凝膠可以在染色1小時(shí)后儲(chǔ)存在超純水中。凝膠也可以長(zhǎng)時(shí)間留在染色液中, 只有蛋白質(zhì)被染色，不會(huì)增加背景染色。
4、染色液可以重復(fù)利用 2-3 次，靈敏度會(huì)有輕微下降，如重復(fù)使用請(qǐng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。
染色的步驟：
1、將電泳后的凝膠取下放入染色容器中，用適量蒸餾水漂洗一下。
棄蒸餾水，加入適量染色液（以覆蓋過(guò)膠面為宜），在室溫下進(jìn)行溫和的搖晃后達(dá)到適當(dāng)?shù)膹?qiáng)度。
觀察記錄凝膠。
待檢測(cè)蛋白量 | 染色時(shí)間 |
>1 μg | 2 分鐘 |
100ng-1μg | 10 分鐘 |
25ng-100ng | 30分鐘 |
2ng-25ng | 60分鐘 |
凝膠干燥的步驟：
1、確保凝膠染色至少1小時(shí)。雖然蛋白質(zhì)帶在染色幾分鐘后就會(huì)顯現(xiàn)，但染色過(guò)程通常在1小時(shí)培養(yǎng)后完成。根據(jù)你使用的凝膠類型，可能需要更長(zhǎng)的孵化時(shí)間。在完成染色過(guò)程之前進(jìn)一步加工凝膠可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)的脫色和靈敏度降低。如果發(fā)生這種情況，只需在染色液中進(jìn)行隔夜孵化，即可保留凝膠。
2、將凝膠浸入大約100毫升的超純水中，溫度為70°C（在微波爐中加熱30到60°C）。在輕輕搖晃的同時(shí)至少孵化1小時(shí)?？杉尤脒x擇性吸附紙或紙巾。凝膠可以在水中隔夜孵化。
3、在“凝膠干燥溶液”（如4%甘油，20%乙醇在水中）中孵化凝膠2分鐘。在酒精溶液中孵出任何帶有考馬斯亮藍(lán)的凝膠，終都會(huì)導(dǎo)致條帶的染色，因此避免孵出時(shí)間超過(guò)5分鐘。
4、這種凝膠現(xiàn)在可以在濕的玻璃紙膜之間干燥了。
用于質(zhì)譜（MS）分析的處理步驟：
1、切除染色的目標(biāo)蛋白帶并轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的EP管。
2、加入1毫升30%乙醇或30%丙酮或30%乙酸（注意：乙酸可能導(dǎo)致N-端的乙?；?/span>
3、孵化20min（在60°c–70°c孵化，以提高脫色效率）。
4、至少三次重復(fù)第2和第3步，或直到凝膠清晰。
常見問題Q&A：
常見問題Q | 解決辦法A |
染色原理是什么？ | 與經(jīng)典考馬斯亮藍(lán) G250染色原理相同（與蛋白質(zhì)中堿性氨基酸結(jié)合），優(yōu)點(diǎn)是更加快速和更高的靈敏度。 |
染色后的凝膠能做質(zhì)譜分析嗎？ | 可以。請(qǐng)參閱“用于質(zhì)譜（MS）分析的處理步驟”。 |
能重復(fù)使用嗎？ | 可以重復(fù)使用 2-3 次。 但靈敏度有所下降，可以通過(guò)延長(zhǎng)染色時(shí)間來(lái)彌補(bǔ)。 |
染膠的適合溫度是多少？ | 為達(dá)到適合的染色效果，推薦常溫（20-25℃）染色。 |
需要低溫貯存嗎？ | 不需要低溫貯存，常溫貯存（20-25℃）即可。4-8℃貯存，會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生，37℃溫浴融化后可繼續(xù)使用。 |
染色后，凝膠可以用蒸餾水保存嗎？ | 可以，蒸餾水保存很簡(jiǎn)單，也可以保存在染色液中。 |
染色的凝膠能做 Western Blot嗎？ | 不可以。蛋白的染色是不可逆的，染色的凝膠不能用作下游的轉(zhuǎn)膜操作。 |
為什么凝膠過(guò)夜染色后條帶出現(xiàn)涂抹狀拖尾？ | 過(guò)夜染色不會(huì)對(duì)凝膠過(guò)度染色。 出現(xiàn)抹涂狀拖尾原因是：上樣量太大或分子量較小導(dǎo)致。 |
該染色液有固定凝膠的作用嗎？ | 沒有固定凝膠的作用。由于染色會(huì)在 60 分鐘內(nèi)完成，染色前無(wú)需對(duì)凝膠進(jìn)行固定。 |
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