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            細(xì)胞培養(yǎng)基的相關(guān)知識點分析

            閱讀:2387        發(fā)布時間:2020/4/2
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               細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計的適于其生長的*培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激素、生長因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(5%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進(jìn)正常人類微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長,并為其達(dá)到理想營養(yǎng)平衡狀態(tài)。
              細(xì)胞培養(yǎng)的意義
             ?、笨梢赃M(jìn)行植物體外受精及植物胚胎發(fā)育過程研究。
             ?、部梢赃M(jìn)行植物生長發(fā)育有關(guān)的重要基因或影響因素的研究。
             ?、晨梢苑奖愕赝ㄟ^實驗手段培育植物新品種。
              細(xì)胞培養(yǎng)基優(yōu)點:
              - 成份確定:無需飼養(yǎng)層的人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基;
              - 充分驗證:> 1100篇同行評審的文獻(xiàn)中被引用;
              - 效果穩(wěn)定:含有預(yù)篩選的成份(包括BSA),使培養(yǎng)基效果穩(wěn)定,且能夠保護(hù)培養(yǎng)物免受內(nèi)毒素和培養(yǎng)環(huán)境壓力的影響;
              - *的培養(yǎng)hPSC的金標(biāo)準(zhǔn);
              - 已經(jīng)用于60多種iPS細(xì)胞系。
              細(xì)胞培養(yǎng)基使用的注意事項:
              (1)細(xì)胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水,醫(yī)藥生產(chǎn)上一般為注射用水。
             ?。?)建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,組分可能會變質(zhì)或因受潮而結(jié)團(tuán)。
             ?。?)溶解干粉培養(yǎng)基時先加入終體積90%~95%的培養(yǎng)用水,添加劑加完后再補(bǔ)足。
              (4)如需添加的組分較多時,某一組分*溶解后,再添加另一組分。
             ?。?)待培養(yǎng)基*溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產(chǎn)生沉淀。
             ?。?)所有成分*溶解后,培養(yǎng)基應(yīng)立即過濾或高壓除菌,以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。
             ?。?)由于除菌過濾后,pH值可能會升高0.1~0.2個單位,因此在過濾前,可將pH調(diào)至比所需值低0.1~0.2個單位。
             ?。?)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,建議不加或加少量的抗生素,如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應(yīng)降低一些。
              (9)建議用1NHCl或1NNaOH來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,因為用碳酸氫鈉調(diào)pH值對培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大。
              細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生長環(huán)境,是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。當(dāng)它是粉劑時,傾向性地稱為培養(yǎng)基,將粉劑配成液體后,多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常補(bǔ)加血清、抗生素等營養(yǎng)成分。

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