EA.hy926人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基多次重復(fù)實驗證明人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞在相應(yīng)*培養(yǎng)基中能持續(xù)多次傳代仍能保持原代細胞的分化狀態(tài)。
    人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基中已包含了高質(zhì)量的血清和人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞所需生長因子，可直接用于人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)。
單純細胞培養(yǎng)的話，主要是這些耗材：

1. 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基一般試劑和耗材：

（1）*培養(yǎng)基：一般是用不*培養(yǎng)基+10%FBS（胎牛血清）自己配的，有時也添加雙抗預(yù)防細胞感染。具體培養(yǎng)基類型根據(jù)你養(yǎng)的細胞類型去選擇。

（2）胰蛋白酶：簡稱是胰酶，消化細胞用的。

（3）培養(yǎng)皿：10cm、6cm等，具體根據(jù)情況進行選擇；有些特殊的細胞類型還會用到培養(yǎng)瓶。

（4）吸管、槍頭、顯微鏡、50ml管等。

2. 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基細胞凍存試劑和耗材：

（1）凍存液：一般用10%DMSO+FBS+培養(yǎng)基組成，FBS和培養(yǎng)基的比例依細胞類型決定，比較珍貴的細胞一般用90%FBS，一般的細胞可以用50%FBS+40%培養(yǎng)基來配制。

（2）胰蛋白酶等用于細胞培養(yǎng)的一般試劑。

（3）凍存管、離心管、離心機、吸管、槍頭、顯微鏡、凍存盒、冰箱、液氮罐等。

3. 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基細胞復(fù)蘇試劑和耗材：

（1）一般試劑和耗材。

（2）水浴箱等。

EA.hy926人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞

常見問題及解決方案:

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、 細胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

3、對于生長緩慢的貼壁細胞：可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。

4、對于生長不均的貼壁細胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時（即某一區(qū)域細胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白），此時可將細胞進行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

復(fù)蘇細胞注意事項：

1收到細胞后當(dāng)天換液，全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基，放進培養(yǎng)箱，第二天再消化。

2邊觀察邊消化，根據(jù)細胞的形態(tài)，終止消化時間，采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣，如可吹打下來，即終止消化。客戶摸索比較好的消化時間。

3隨細胞有一份細胞操作說明書，請客戶仔細查看。

4記得加1%雙抗，降低被污染的概率。另外盡早凍存留種，以備后用。

5售后時間為一周，僅限于細胞本身的質(zhì)量問題，而因乙方自己不當(dāng)操作（不規(guī)范操作，消化過度，不加雙抗導(dǎo)致的污染等）導(dǎo)致的細胞問題不在售后范疇。

收到細胞后，如細胞狀態(tài)不佳，或培養(yǎng)中遇到問題，煩請當(dāng)天盡快聯(lián)系，以便處理。當(dāng)天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù)，請您務(wù)必重視。

7剛收到細胞時，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天，利于細胞盡快恢復(fù)狀態(tài)，細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，再調(diào)回10%即可。