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            初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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            蛋白質(zhì)相互作用:MolBoolean Mouse/Rabbit蛋白質(zhì)檢測(cè)方案

            時(shí)間:2024/10/9閱讀:125
            分享:

            MolBoolean Mouse/Rabbit(貨號(hào):ATL-MolB00001 ) 是一種用于組織和細(xì)胞中原位蛋白質(zhì)鄰近分析的試劑盒。MolBoolean 分析利用專有的寡核苷酸設(shè)置,能夠同時(shí)檢測(cè)兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)(蛋白 A、蛋白 和相互作用蛋白 AB)的游離和相互作用(~40 nm 鄰近)組分。

            MolBoolean 小鼠/兔應(yīng)使用用戶選擇的一抗(在小鼠和兔中產(chǎn)生)進(jìn)行。MolBoolean 依靠抗小鼠和抗兔次級(jí)接近探針和滾環(huán)放大 (RCA) 作為放大信號(hào)的手段。

            在 MolBoolean 分析中執(zhí)行的一系列分子步驟將信息整合到擴(kuò)增產(chǎn)物中,表明抗體靶標(biāo)與相互作用蛋白的結(jié)合。該信息通過(guò)檢測(cè)報(bào)告基因的結(jié)合轉(zhuǎn)換為熒光信號(hào),從而可以在常規(guī)熒光顯微鏡上進(jìn)行可視化。提供圖像分析軟件來(lái)分割和區(qū)分熒光信號(hào),從而能夠相對(duì)定量樣品中兩個(gè)分析蛋白質(zhì)靶標(biāo)的游離組分與相互作用組分。

            MolBoolean 試劑盒包含15個(gè)獨(dú)立的試管。試劑盒體積為4.8 ml,可在細(xì)胞中進(jìn)行約120次檢測(cè)(40 μl/assay),在組織中進(jìn)行約60次檢測(cè)(80 μl/assay)。

             

            艾美捷MolBoolean Mouse/Rabbit#ATL-MolB00001成分:

            TUBE NUMBER TUBE ID

            Blocker(4x)

            Diluent(1x)*

            Probe A(80x)

            Probe B(80x)

            Circle(40x)

            Additive(40x)

            Buffer A(10x)

            Nickase enzyme(80x)

            Buffer B(8x)

            10 Tag oligos(40x)

            11 Ligase enzyme(80x)

            12 Polymerase enzyme(40x)

            13 Buffer C(5x)

            14 Detection oligos(40x)

            15 Buffer D(10x)

            *使用前,將Tween-20加入Diluent (1x) (tube 2) 至終濃度為0.1% (v/v) 制備“w全稀釋劑"

            10ml TBS中加入0.2 ml Tween-20,制備2% (v/v)Tween-20中間溶液。用玻璃燒杯和磁力攪拌器攪拌10分鐘。

            Diluent (1x)  (e.g. 25 ul of 2 % Tween-20 intermediate to 475 ul Diluent)稀釋得到最終的w全稀釋液。將w全稀釋液保存在4°C,并在1周內(nèi)使用。


            為什么選擇MolBoolean ?

            通過(guò)同時(shí)檢測(cè)自由和相互作用的蛋白質(zhì),完成蛋白質(zhì)相互作用的空間定量分析。

            通過(guò)相互作用數(shù)據(jù)歸一化到總目標(biāo)蛋白水平的精確定量。

            無(wú)需工程蛋白表達(dá)的生物學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。

            通過(guò)滾動(dòng)圈放大,熒光信號(hào)增加1000倍,允許檢測(cè)和定量低豐度蛋白質(zhì)。

            適應(yīng)不同的研究需求。

            通用試劑盒,可用于客戶選擇的一抗。

            在細(xì)胞和組織中驗(yàn)證。

             

            MolBoolean Mouse/Rabbit檢測(cè)步驟:

            MolBoolean 檢測(cè)包括七個(gè)步驟來(lái)檢測(cè)蛋白質(zhì)是相互作用還是單獨(dú)存在

            1.Proximity Probe Binding:探針與一抗結(jié)合。

            2.探針臂雜交:探針臂與 DNA 環(huán)寡核苷酸雜交。

            3.DNA 切口:在 DNA 中引入缺口以進(jìn)行進(jìn)一步處理。

            4.標(biāo)簽寡核苷酸摻入:將標(biāo)記的寡核苷酸摻入 DNA 中。

            5.DNA 連接:DNA 末端的連接。

            6.Rolling Circle Amplification:擴(kuò)增環(huán)狀 DNA 以增強(qiáng)信號(hào)。

            7.檢測(cè):結(jié)果的可視化和分析。

             

            試劑盒運(yùn)輸及儲(chǔ)存:

            MolBoolean 小鼠/兔試劑盒可在固定細(xì)胞和FFPE組織樣本中進(jìn)行MolBoolean分析。試劑盒體積,4.8 ml總工作體積,足以在細(xì)胞中進(jìn)行大約120次檢測(cè)(40ul/assay),在組織中進(jìn)行60次檢測(cè)(80ul/assay)。40?l的測(cè)定體積應(yīng)足以覆蓋1 cm2的樣品面積。相應(yīng)地調(diào)整以匹配您的實(shí)驗(yàn)設(shè)置。

            MolBoolean試劑盒包含15個(gè)獨(dú)立的試劑盒管,這個(gè)工具箱是用干冰運(yùn)輸?shù)?。收到后,將所有試劑保存?span style="font-family: Calibri;">-20°C。Diluent (1x) 也可以在4°C下保存長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。

             

            關(guān)于MolBoolean:

            克服原位聚乳酸限制

            與原位聚乳酸等傳統(tǒng)方法相比,MolBoolean 具有多種優(yōu)勢(shì),可解決數(shù)據(jù)解釋中的關(guān)鍵空白,并提供更多信息

            數(shù)據(jù)規(guī)范化

            MolBoolean,蛋白質(zhì)相互作用的數(shù)量可以歸一化為目標(biāo)蛋白質(zhì)的總數(shù)。這是至關(guān)重要的,因?yàn)榘械鞍姿娇梢允艿礁鞣N因素的影響,如細(xì)胞治療或疾病狀態(tài)。通過(guò)提供標(biāo)準(zhǔn)化的測(cè)量,MolBoolean 允許更準(zhǔn)確的樣本之間的比較。

             

            相互作用和非相互作用的檢測(cè)

            分?jǐn)?shù):與傳統(tǒng)方法不同,MolBoolean?可以檢測(cè)細(xì)胞和組織中兩種蛋白靶標(biāo)的非相互作用內(nèi)源性組分及相互作用。更全面的檢測(cè)能力增加了可以從實(shí)驗(yàn)中提取的空間信息,使研究人員能夠確定蛋白質(zhì)相互作用的位置。

            一致的分子過(guò)程

            滾動(dòng)循環(huán)產(chǎn)品(rcp)源于自由或相互作用的蛋白質(zhì)是通過(guò)相同的分子過(guò)程步驟產(chǎn)生的。這確保了均勻的信號(hào)效率,減少了數(shù)據(jù)分析過(guò)程中的不確定性。

             

            總體而言,MolBoolean 為檢測(cè)蛋白質(zhì)相互作用提供了更可靠、更全面的解決方案,解決了數(shù)據(jù)解釋中的關(guān)鍵空白,并為研究人員提供了更準(zhǔn)確的細(xì)胞和組織中分子相互作用的見(jiàn)解。


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