ALB檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于測量小鼠的ALB生物樣本。如果ELISA要在預(yù)期用途之外使用，用戶可能需要優(yōu)化所述使用。

艾美捷小鼠白蛋白ELISA試劑盒（E-90AL）檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的原理在圖1中表示。在這種測定中，樣品中存在的白蛋白（ALB）與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗ALB抗體反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗ALB抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的ALB形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB），測定免疫吸附劑上結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測試樣品中ALB的濃度直接相關(guān)；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中ALB濃度的量度。測試樣品中ALB的量可以從標(biāo)準曲線中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

未提供的所需材料：

精密移液器（2微升至100微升），用于制備和分發(fā)稀釋液

試管

噴霧瓶或微孔板洗滌器/抽吸器

蒸餾水或去離子水

微孔板讀取器

用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

樣本收集用的離心機

血漿收集用的抗凝劑

計時器

小鼠白蛋白ELISA試劑盒樣本收集和處理：

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險。處理和處置時遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣本出現(xiàn)凝固、嚴重溶血、脂血，或樣本完整性受到質(zhì)疑，請做記錄并謹慎解釋結(jié)果。

以下列出的樣本收集和儲存條件僅供參考。尚未評估樣本穩(wěn)定性。

血清樣本 - 應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。血凝塊形成后通過離心分離血清。取出血清并立即進行測定或分裝樣本并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

血漿樣本 - 應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行測定或分裝樣本并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

尿液樣本 - 使用無菌或干凈的尿液收集器收集中段尿液。離心以去除細胞碎片。立即進行測定或分裝樣本并儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

已知干擾物質(zhì) - 濃度高于0.1%的氮化物和硫柳汞會抑制酶反應(yīng)。

樣本稀釋：

測定要求在測試前對每個測試樣本進行稀釋。每次進行測定時，所有樣本都應(yīng)以雙份進行測定。推薦的稀釋只是建議。稀釋應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，使稀釋后的樣本落在標(biāo)準曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋。

血清樣本 - 推薦的起始稀釋為1/500,000。要準備1/500,000的樣本稀釋，將2微升的樣本轉(zhuǎn)移到1998微升的1倍稀釋液中。這給出1/1,000的稀釋。接下來，將1/1,000的樣本通過轉(zhuǎn)移2微升到998微升的1倍稀釋液中進行稀釋。這產(chǎn)生1/500,000的稀釋。每個階段都要c底混合。

血漿樣本 - 推薦的起始稀釋為1/500,000。要準備1/500,000的樣本稀釋，將2微升的樣本轉(zhuǎn)移到1998微升的1倍稀釋液中。這給出1/1,000的稀釋。接下來，將1/1,000的樣本通過轉(zhuǎn)移2微升到998微升的1倍稀釋液中進行稀釋。這產(chǎn)生1/500,000的稀釋。每個階段都要c底混合。

尿液樣本 - 推薦的起始稀釋為1/500。要準備1/500的樣本稀釋，將2微升的樣本轉(zhuǎn)移到998微升的1倍稀釋液中。這給出1/500的稀釋。c底混合。

小鼠白蛋白ELISA試劑盒試劑準備：

使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

稀釋液濃縮液 - 提供的稀釋液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，4份dH2O）稀釋1/5。

洗滌液濃縮液 - 提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）稀釋1/20。濃縮液在儲存溫度較低時可能會形成晶體。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解晶體。

酶-抗體結(jié)合物 - 通過向每個微孔板測試條中添加10微升酶-抗體結(jié)合物到990微升1倍稀釋液中，計算每個微孔板測試條所需的工作結(jié)合物溶液量。使用前立即稀釋，并避光保存。均勻但輕柔地混合。避免起泡。

預(yù)涂覆ELISA微孔板 - 按提供狀態(tài)使用。打開箔袋，從袋中取出板。取出在測定中不會使用的所有的條和孔，放回袋中并重新密封，連同干燥劑。

小鼠ALB校準液 - 根據(jù)批次特定的分析證書進行準備。