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            上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>純化試劑盒>>樣本細胞保存液

            樣本細胞保存液

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            • 所在地 上海市

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            更新時間:2022-04-13 09:34:54瀏覽次數(shù):203

            聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

            產品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2.5L
            貨號 FS-P013313 應用領域 化工
            主要用途 公司產品僅供科研    
            樣本細胞保存液正在出售的產品:蘋果酸脫氫酶(EC1.1.1.37)規(guī)格:10KU/瓶
            β-羥丁酸脫氫酶(EC1.1.1.30)規(guī)格:10KU/瓶
            甘油激酶 (EC2.7.1.30)規(guī)格:10KU/瓶

            詳細介紹

            實驗外包:

            1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

            2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

            3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

            4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

            5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

            6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

            7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

            8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

            產品名稱

            規(guī)格

            貨號

            樣本細胞保存液

            2.5L

            FS-P013313

             

            QQ截圖20201022162313.png 

            組成及試劑配制:

            1、酶標板:一塊(96孔)

            2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

            3、 樣品稀釋液:1×20ml。

            4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

            使用方法:

            一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

            1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

            2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

            3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

            4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

            5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

            6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

            7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

            二、樣品DNA的制備

            8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

            多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

            一個是NC(樣品制備陰性對照)。

            可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

            9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

            三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

            10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。

            11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

             

             

             

             

             

             

             

             

            PCR實驗步驟:

            ①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

            ②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

            ③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

            ④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

            ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

            ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

            特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

            SEK1/MKK4/FITC 熒光標記原活化蛋白激激4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

             TGF- Alpha /FITC 熒光標記轉移生長因子–α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

            Rhesus antibody Rh ADAM18 去整合樣金屬蛋白18抗體  0.2ml

            Rabbit  chicken IgG/PE PE標記的兔抗雞IgG 0.1ml

            GPR109A G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體 0.1ml

            Rhesus antibody Rh Rabbit  Bovine IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗IgM  0.1ml

             TGF- Alpha /FITC 熒光標記轉移生長因子–α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

            CNP(Human C -type natriuretic peptide) ELISA Kit 人C型鈉尿肽Multi-class antibodies: 48T

             HBsAg 人乙肝表面抗原抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

            Rhesus antibody Rh MKP-2/DUSP4 原活化蛋白激磷-2抗體  0.1ml

            PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit 人脫氫E1 96T

            RASSF1A Ras相關區(qū)域家族1A抗體 0.1ml

            CHIA 哺乳動物性幾丁質抗體 0.1ml

             HBsAg 人乙肝表面抗原抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

            Rabbit  human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗人IgM 0.1ml

            GPR180 G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體 0.2ml

            Rhesus antibody Rh Alpha-Synuclein/Syn/SNCA 核突觸蛋白α抗體  0.1ml

             Kif14 protein /FITC 熒光標記驅動蛋白家族Member14蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

            Rhesus antibody Rh Rabbit  Guinea pig IgM/PE PE標記的兔抗豚鼠IgM  0.1ml

             Phospho-SirT1 (Ser27)/FITC 熒光標記磷化沉默調節(jié)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
            樣本細胞保存液小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測試劑盒

            小鼠干擾α-抗體(IFN-α-Ab)elisa檢測試劑盒

            小鼠誘導型一氧化氮合成(NOS2/iNOS)elisa檢測試劑盒

            小鼠核因子κB受體活因子(RANκ)elisa檢測試劑盒

            小鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)elisa檢測試劑盒

            小鼠谷胱甘肽S-轉移θ2(GSTt2)elisa檢測試劑盒

            小鼠白介9(IL-9)elisa檢測試劑盒

            小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)elisa檢測試劑盒

            小鼠抑制結合蛋白(INHBP)elisa檢測試劑盒

            小鼠鐵調(Hepc)elisa檢測試劑盒

            小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)elisa檢測試劑盒

            小鼠肝結合性表皮生長因子(HB-EGF)elisa檢測試劑盒

            小鼠胰島樣蛋白5(INSL5)elisa檢測試劑盒

            小鼠神經生長因子(NGF)elisa檢測試劑盒

            小鼠血紅氧合1(HO-1)elisa檢測試劑盒


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