化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013564
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 人鈣網(wǎng)蛋白Multi-class antibodies： 48T
SM-MHC 心肌肌凝蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血紅氧合1
NT5C1A 胞質(zhì)5'核苷1A抗體 0.2ml
beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)單克隆抗體 0.1ml
SM-MHC 心肌肌凝蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人單胺氧化Multi-class antibodies： 48T
P95/NBS1 DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-6 白介6抗體 0.1ml
MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A 96T
PROK1/PRK1/EG-VEGF 腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體 0.1ml
CACH2 L型鈣通道蛋白抗體 0.1ml
P95/NBS1 DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLEPP1 腎小球上皮蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB4 含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體 0.2ml
HSP-90 Beta/FITC 熒光標(biāo)記HSP-90β蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
PKA/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激A抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次Sphingomonasyantingensis種屬: Sphingomonasyantingensis分離基物: 紫色土安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 102生長條件: 30℃
米根霉種屬: RhizopusoryzaeWentetPrinsen-Geerligs安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)乳和糖化培養(yǎng)基: 17,77生長條件: 28-30℃
羅氏耶爾森氏菌種屬: Yersinia│rohdei提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
北京諾卡氏菌種屬: Nocardia│beijingensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0234生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)ELISA試劑盒AR,99.5%反,反-2,4-庚二烯 90%加拿大香脂
D-乳脫氫(D-LDH)ELISA試劑盒CP,99.5%三硫酮 ≥99%, FG正己(>98%，BR)
D二聚體(D2D)ELISA試劑盒GR,99.8%4-羥基-3-甲氧基甲 98%己內(nèi)酰(>98%，BR)
DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)ELISA試劑盒PT,99.8%六酮 99%羧肽 Y >50 U /mg
DNA甲基轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)ELISA試劑盒光譜級2-異基-4-甲基噻唑 98%蓖麻油
DNA甲基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)ELISA試劑盒用于和昆蟲培養(yǎng)，≥99.5% (T)3-甲基-1-丁硫 97%1,1-環(huán)己基二乙
DnaJ同源亞科B成員1(DNAJB1/DNAJ1/HDJ1/HSPF1)ELISA試劑盒for HPLC, ≥99.5% (AT)甜瓜 80%反式-1,2-環(huán)己二四乙(>98%，BR)
Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒用于植物培養(yǎng), ≥99.5%2-甲基庚 98%乙纖維
Dickkopf 3(DKK3)ELISA試劑盒USP香草甲酯 99%乙鈰(>99%，BR)
Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒≥99.999% (metals basis)4-甲硫基-4-甲基-2-戊酮 99%硫鈰四(>99%，BR)
DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒農(nóng)殘級, ≥99.5%4-甲基-4-巰基-2-戊酮 98%碳銫(>99%，BR)
C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒用于分子生物學(xué), ≥99.5% (AT)3-甲硫基-1-己 99%滂天藍(~50%,BS)
C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒99.99% metals basis3-巰基-1-己 98%銨-T三(>98%,BR)
C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒化 GR,99.8%3-甲基-2--1-硫 98%卡拉唑黑E(>70%,BS)
C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒化 AR,99.5%2-甲基-3-呋喃硫 95%金三
C多肽(CP)ELISA試劑盒化 CP,99.5%2-甲基四-3-硫 97%鉑六
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