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詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013573 |
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
Human granulysin,GNLY ELISA Kit 人顆粒溶Multi-class antibodies： 48T
Smad4 Smad4抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/Bio 生物標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
NPC(Human nasopharyngeal carcinoma) ELISA Kit 人鼻咽癌 96T
NOL8 核仁蛋白8抗體 0.2ml
Bid BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 0.1ml
Smad4 Smad4抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Free-T3(Human Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 人游離三碘甲狀腺原Multi-class antibodies： 48T
Lyn 膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KIF5A/NKHC1 驅(qū)動蛋白KIF5A抗體 0.2ml
E3 ELISA Kit 大鼠雌三醇 96T
PRODH 脯脫氫抗體 0.2ml
phospho-c-Abl(Thr735) 磷化非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml
Lyn 膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey Guinea pig IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.5ml
GLTSCR2 膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASH1L ASH1蛋白抗體 0.2ml
HSP22/FITC 熒光標(biāo)記熱休克蛋白-22抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Phospho-PIM1(Tyr218) /FITC 熒光標(biāo)記磷化前病毒整合位點(diǎn)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
乙型肝炎病毒B型染料法熒光定量PCR試劑盒多形擬桿菌種屬: Bacteroides│thetaiotaomicron分離基物: 人臉提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株；與柳杉花粉熱有關(guān)培養(yǎng)基: 244生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 4a IV 3,4...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
變形桿菌種屬: Proteus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: Kauffmann血清型 34 6培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 1b I 4,6...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
60S核糖體蛋白L17(RPL17)ELISA試劑盒2,3-二溴丁二 98%乙偶姻 分析標(biāo)準(zhǔn)品，單聚體哲納爾氏染色
5脂加氧(5-LO/LOX)ELISA試劑盒二乙烯三五乙 CP乙偶姻 Natural,≥96%（GC), FCC蛋白激仰制劑KT5823(>97%(HPLC),BC)
5羥吲哚乙(5-HIAA)ELISA試劑盒二乙烯三五乙 AR,99.0%2,3-丁二酮 98%L-阿拉伯糖(>98%,BR)
5-羥色受體6(HTR6)ELISA試劑盒鹽二 99%二氫錳 CPL(-)-二甲酰一(>98%,BR)
5羥色(5-HT)ELISA試劑盒鹽二乙 CP，98%二氫錳 AR乳糖(>98%,BC)
5羥基吲哚乙(5-HIAA)ELISA試劑盒鹽二乙 AR，99%茜綠 ARL-氨基氧化
5羥二十碳四烯(5-HETE)ELISA試劑盒鹽乙二 AR,99%2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二甲 96%L-氨基氧化
5核苷(5-NT)ELISA試劑盒甲酰 CP,99.0%二氫錳 AR乙鑭五(>99%,BR)
5'-AMP活化蛋白激α-2催化亞基(PRKAA2)ELISA試劑盒2-氟乙 95%焦 AR,99%L-刀豆氨硫鹽(>98%,BR)
4-羥基壬烯(HNE)ELISA試劑盒吉拉爾特試劑T 98%焦 CP,98%肉鹽鹽(>98%,BR)
40S核糖體蛋白S19(RPS19)ELISA試劑盒溴代十六基吡啶 96%焦 電鍍級肉鹽(>99%,BR)
3氧代5α類固4脫氫2(SRD5A2)ELISA試劑盒二 AR,99.5%2-乙烯吡啶 97%式醋鉛
3型1-鞘氨受體(S1P3)ELISA試劑盒N-甲基嗎啉 CP，98%靛藍(lán) CP,85%鉛一(II)(>98%,BC)
3-硝基酪氨(3-NT)ELISA試劑盒N-甲基嗎啉 GR，99%靛藍(lán) AR,90%氟化鉛(>99%,BC)
3-羥基-3-甲基戊二酰輔A合1(HMGCS1)ELISA試劑盒N-甲基嗎啉 重蒸餾，99.5%靛藍(lán) 98%化鉛(>98%,BR)
3-葡萄糖苷孕二(PdG)ELISA試劑盒N-甲基嗎啉 用于蛋白質(zhì)測序, ≥99.8% (GC)靛藍(lán) 分析標(biāo)準(zhǔn)品黃色氧化鉛(>99%,BC)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
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