化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛腺病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013491
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
LCAT/FITC 熒光標記卵磷酰基轉移抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SREBP-1/FITC 熒光標記調節(jié)元件結合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AHSG/Fetuin A/Alpha 2 HS Glycoprotein 胎球蛋白A 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Ghrelin 腦腸肽抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM 兔抗羊IgM 1mg
SREBP-1/FITC 熒光標記調節(jié)元件結合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆/吡哆醇B6磷Multi-class antibodies： 48T
mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Influenza A virus (Duck) 鴨流感病毒抗體 0.2ml
Human SS-B/La Antibody ELISA Kit 人抗SS-B/La抗體 96T
PSCA 前列腺干細胞抗原抗體 0.1ml
CCDC74B 卷曲螺旋結構域蛋白74B抗體 0.1ml
mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit MG IgG/PE PE標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
Guanylyl Cyclase alpha 2 鳥苷環(huán)化α2/GCS-α-2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AQP2 通道蛋白-2抗體 0.1ml
IL-3/FITC (mouse, rat) 熒光標記白介3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗貂IgG 0.1ml
PPIG/FITC 熒光標記親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIG抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
牛腺病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒50次鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
胞內分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium intracellulare提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium pyrenivorans提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 28存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
甲狀旁腺1-34(PTH 1-34)ELISA試劑盒鄰氨基 98%2-氟-3-甲氧基 97%十溴二
甲狀旁腺(PTH)ELISA試劑盒3，3-二基 99%2-氟-4- 96%氨基雜環(huán)鹽鹽
甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒1-二氫茚酮 99%2-氟-5-三氟 98%春雷霉;春日霉; 克死霉
甲酰甲硫氨(fMet)ELISA試劑盒二酰 97%2-氟-6-甲氧基 98%土拉霉A，托拉菌A,泰拉霉
甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒4-硝基肉桂 98%3-氟-4- 97%土拉霉A(標準品)
甲基化(Methylase)ELISA試劑盒二 98%4-氟 99%拉氧頭孢鈉
甲基化CpG結合蛋白2(MECP2)ELISA試劑盒3,4,5-氧基肉桂 99%2-氟-4-(三氟甲基) 97%原花青
喋呤(MTX)ELISA試劑盒二基（2，4，6-?；┭趸?97%3-羥 97%原花青（標準品）
己糖激3(HK3)ELISA試劑盒槲皮,二 97%2-羥基 97%胡椒
己糖激(HK)ELISA試劑盒槲皮 分析標準品，≥98.5%3-羥基 97%胡椒(標準品)
幾丁質3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)ELISA試劑盒槲皮 97%4-異喹啉鹽鹽 98%紐莫康定B0(肺囊康定)
幾丁質1(殼三糖)(CHIT1)ELISA試劑盒槲皮,二 分析標準品，≥98% (HPLC)4-異基 98%福莫特羅
集落激因子(CSF)ELISA試劑盒L-鼠李糖，一 99%4-異氧基 98%溴甲后馬托品
集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒二氧化硫脲 98%6-甲氧基-2-萘 97%乙阿比特龍酯
低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA試劑盒4,5-二鄰二 98%4-甲氧基-2-三氟 96%溴莫尼定
低密度脂蛋白(VLDL)ELISA試劑盒甲酰肼 90%3-甲氧基羰基 97%磺草靈
化工儀器網(wǎng)