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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：嗜水氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013500
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Phospho-LATS1 (Thr1079) /FITC 熒光標記磷化抑制基因LATS1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SPY /FITC 熒光標記抗spindly抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgM/Bio 生物標記的兔抗豚鼠IgM 0.3ml
GLP-2 胰高血糖樣肽-2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPY /FITC 熒光標記抗spindly抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PS(Human Prednisolone) ELISA Kit 人潑尼松龍Multi-class antibodies： 48T
M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮激-M2Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF15 驅(qū)動蛋白家族成員15抗體 0.2ml
DHEA-S ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮酯 96T
PRSS3 腦胰蛋白3抗體 0.2ml
phospho-CDKN2A (Ser152) 磷化抑癌基因p16抗體 0.1ml
M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮激-M2Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Mink IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗貂IgG 0.1ml
GPR 151 G蛋白偶聯(lián)受體151抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARA24 雄受體相關(guān)蛋白24抗體 0.2ml
IL-1R II /FITC 熒光標記白介1受體Ⅱ抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/FITC FITC標記的兔抗貂IgG 0.3ml
PP2Ac/FITC 熒光標記磷酯-2Ac抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
嗜水氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次邊緣假單胞菌邊緣致病變種種屬: Pseudomonas marginalis pv. margnalis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: NB生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
青海擬諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│quinghaiensis分離基物: 鹽性土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: MA生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
凝結(jié)芽孢桿菌種屬: Bacillus│coagulans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28-32℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
紅膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒2,6-二硝 分析標準品, 用于環(huán)境分析無檸檬 CP, ≥99.0% (T)芹糖異甘草苷；異甘草苷芹糖
紅激因子(ESF)ELISA試劑盒2,4-二硝 CP檸檬,一 Standard for GC白屈菜紅(標準品）
橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒3-氨基吡唑 98%檸檬,一 ACS, 99.0-102.0%TAE684
亨廷頓相關(guān)蛋白1(HAP1)ELISA試劑盒4-(甲基)甲酰 98%檸檬鈉，二 AR,99.0%青蒿(標準品)
黑瘤衍生亮氨拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA試劑盒3,4-二甲氧基酚 97%檸檬鈉，二 CP,98.0%防己諾林
黑色抗體(MC Ab)ELISA試劑盒3-羧基甲 97%二合檸檬鈉 GR澳茄新
黑色(MSH)ELISA試劑盒2-羥基-6-甲基煙 98%檸檬鈉，二 ACS, ≥99.0% (NT)五合硫金雀花/硫鷹爪豆(標準品)
黑色濃縮(MCH)ELISA試劑盒醋丁纖維 30-35%檸檬鈉，二 用于分子生物學(xué), ≥99%（GC)五合硫金雀花/硫鷹爪豆
黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒醋丁纖維 35-39%4-甲氧基甲酰 97%N-甲基金雀花氫鹽
黑色瘤相關(guān)抗原D4(MAGED4/MAGED4B)ELISA試劑盒醋丁纖維 44-50%2-甲基-1,3- 99%辛弗林(標準品)
黑色瘤活性抑制蛋白(MIA)ELISA試劑盒醋丁纖維 50-54%納米羥基灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%辛弗林
黑色瘤標記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒2-氨基-8-萘酚-6-磺 90%，工業(yè)級硝鐿 99.9% metals basis辛弗林鹽鹽
核轉(zhuǎn)錄因子κBp65(NFκBp65)ELISA試劑盒1,5-二羥基萘 98% 氟化鐿 99.99% metals basis三尖杉寧(標準品）
核轉(zhuǎn)錄因子κB(NFκB)ELISA試劑盒4,4'-二乙烯二羧 96%硝鐿 99.99% metals basis吉莫斯特;吉(標準品)
核因子κB抑制物激β(IKK-β)ELISA試劑盒蓖麻油 >97.0%(T),>70%(GC)羅丹明6G 高純級，95%吉莫斯特;吉美
核因子κB抑制物激α(IKK-α)ELISA試劑盒1,3-酮二羧 97%安息香 99.5%蝙蝠葛諾林(標準品)
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