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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013425
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
LIR-6/CD85i/LILRA1/FITC 熒光標記白細胞球蛋白樣受體6抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SUMO/FITC 熒光標記類泛蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRB1 腎上腺能受體β1抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗羊IgM 0.1ml
GRIK5 谷受體紅藻離子5抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗狗IgG 0.1ml
SUMO/FITC 熒光標記類泛蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
AD(Human amiodarone) ELISA Kit 人乙胺碘呋酮Multi-class antibodies： 48T
PEG3 PEG3蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HIV gp41 艾滋病病毒抗體 0.2ml
BMP-7 ELISA Kit (Rabbit) 兔骨成型蛋白7 96T
Pumilio 2 PUM2蛋白抗體 0.2ml
CNOT6 細胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml
PEG3 PEG3蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP4 GTPIMAP家族成員4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC5 細胞分裂周期蛋白5抗體 0.2ml
IL-17RB/FITC 熒光標記白介-17B受體抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Gold 膠體金標記的兔抗人IgM 0.5ml
RAD51C/FITC 熒光標記癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
副豬嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
赭褐鏈霉菌種屬: Streptomyces│umbrinus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 定期移植法
普通鏈霉菌種屬: Streptomyces│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
紅曲霉種屬: Monascus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 法葡萄糖。培養(yǎng)基: 0013生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
性成纖維生長因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒三乙酰 98%氨茶 98%度他雄(標準品)
性成纖維生長因子(aFGF)ELISA試劑盒特戊酰 98%氨茶 藥用級依達拉奉
松弛肽/松弛(RLN)ELISA試劑盒正戊酰 98%茶 藥典BP級依達拉奉（標準品）
松弛(RLN)ELISA試劑盒 AR,98%茶 無, ≥99%, 粉末氫化奎寧定;雙氫奎尼丁
四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 GCS, ≥99.5% (GC) 1-乙酰咪唑 99%鹽依匹斯汀
四連接(CLEC3B)ELISA試劑盒 GR,99%1,2-二甲基咪唑 99%鹽依匹斯汀(標準品)
死亡相關(guān)蛋白1(DAP/DAP1)ELISA試劑盒 分析標準品癸二二辛酯 AR,97.0%依普利酮
絲狀血球凝集(FHA)ELISA試劑盒碳化 1-200目,98%馬來二丁酯 97%依普利酮（標準品）
絲裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)ELISA試劑盒碳化 1-10 μm，98%癸二二丁酯 98%戊雌二
絲裂原活化蛋白激激6(MKK6)ELISA試劑盒碳化 99%,50nm2-辛酮 98%戊雌二
絲裂原活化蛋白激(MAPK)ELISA試劑盒1,3,3-基-2-亞甲基吲哚啉 98.5%,用于紙層析仲辛 AR，98%依替膦鈉
絲氨肽2甘露聚糖結(jié)合凝集(MASP2)ELISA試劑盒1,3,3-基-2-亞甲基吲哚啉 97%仲辛 CP，97%*度
絲氨蛋白抑制因子肽抑制因子進化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒氮化 1 μm, 98.5%仲辛 Standard for GC,≥99.5% (GC)*度(標準品)
絲氨蛋白HTRA1(HTRA1)ELISA試劑盒碳化硅 99%,0.5～0.7um仲辛 ≥99% (GC)*孕烯
絲氨蛋白(PRSS)ELISA試劑盒化鈦 98%,4 ～ 8μm仲辛 ≥98%,FG依維莫司
絲氨/蘇氨激24(STK24)ELISA試劑盒碳化鈦 99%,2-4μm硫鉍 CP,98.0%醋氟輕松;醋膚輕松
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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