化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013538 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
|
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit 人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白Multi-class antibodies： 48T
SOD1 超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD)Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
AFP(Mouse Alpha-fetoprotein) ELISA Kit 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 96T
NFX1 核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
BCL2L15 BCL2樣15促凋亡蛋白抗體 0.2ml
SOD1 超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD)Multi-class antibodies： 0.1ml
17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羥孕酮Multi-class antibodies： 48T
Ly-6G/Gr-1 細胞抗原6G抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Kinesin 驅(qū)動蛋白KNS1抗體 0.2ml
T3 ELISA Kit 大鼠狀腺原 96T
Proteasome 20S alpha 5 蛋白體PSMα5抗體 0.2ml
CARM1 蛋白精N甲基4抗體 0.1ml
Ly-6G/Gr-1 細胞抗原6G抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey human IgG/PE PE標記的驢抗人IgG 0.1ml
GCAP1 鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSB 芳基酯B抗體 0.2ml
IFABP/FITC 熒光標記小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/Gold 膠體金標記的兔抗猴IgG 2ml
HSP-70/HRP 辣根過氧化物標記熱休克蛋白70抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
巴爾通體通用探針法熒光定量PCR試劑盒50次潰瘍分枝桿菌種屬: Mycobacterium│ulcerans提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
索氏梭菌種屬: Clostridium│sordellii提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)基: CM0121生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
刺黑烏霉菌種屬: Memnoniella│echinata提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
白抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒N-乙基順二酰亞 99%5-乙?；?2-氨基-4-甲基噻唑 98%對氨基酚(>98%,BR)
白活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒N-乙基順二酰亞 超純級，99.5%乙4-（二乙氨基）-2-丁炔酯 98%1,4-雙(5-基-2-噁唑基)(>98%,Scint Grade)
白共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒乙二雙（2-氨基乙基）四乙 ARβ-氨甲酯鹽鹽 99%(>98%,BC)
白彈性蛋白(HLE)ELISA試劑盒乙二四乙三鹽 98%4-叔丁基甲 97%氟化(>98%,BR)
白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒乙二四乙三鹽 99%叔丁基 Standard for GC, ≥99.5% (GC)2,5-二基惡唑(>98%,BC)
白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒N-乙基-N-（3-磺基）-3-鈉鹽 98%叔丁基 CP,98%乙鈉(>98%,BR)
白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 AR，98%叔丁基 99%司班60
白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 色譜級，≥99.0%叔丁基 分析標準品， ≥99.5% (GC)二氧化鈦(>99%,BR)
白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 分子生物學和電泳級，99%4-甲基-2-酮基戊鈣 98%三基(>98%,BR)
白介增強子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)ELISA試劑盒乙二四乙二鈉,二 用于植物培養(yǎng)，≥99.0%亞氨基二乙二乙酯 98%曲拉通X-405(69.0~71.0%)
白介受體相關(guān)激(IRAK)ELISA試劑盒L-谷肽（氧化型）98%1,1-二-2-基環(huán) 97%尿胰蛋白抑制劑
白介9(IL-9)ELISA試劑盒雙甘肽 99%3,5-二叔丁基 98%氧化鋅(>98%,BC)
白介8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒鹽胍 AR,99.0%4-乙基 99%1,6-己二(>98%,BR)
白介8(IL-8)ELISA試劑盒鹽胍 CP,98.0%2-乙基 98%2,4-二氧基乙鈉(>98%,BR)
白介7(IL-7)ELISA試劑盒異硫胍 ≥99%2-茚酮 98%4(5)-甲基咪唑(>98%,BR)
白介6(IL－6)ELISA試劑盒N-2-哌-N'-2-乙磺鈉鹽 99%L-賴氨乙酯 98%4-氧基乙鈉(>98%,植物級)
化工儀器網(wǎng)