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            上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>純化試劑盒>>利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒

            利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒

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            更新時間:2022-04-14 11:21:19瀏覽次數(shù):248

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            產(chǎn)品簡介

            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
            貨號 FS-P013458 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
            主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
            利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒的銷售產(chǎn)品:抗H9亞型病毒HA蛋白小鼠雜交瘤細(xì)胞株;S1B1品牌免疫熒光細(xì)胞流式儀分析試劑盒
            人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒純化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒
            安石榴甙CAS:65995-63-3活體細(xì)胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光(TMRM)測定試劑盒
            半乳糖凝集素8抗體*線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光(

            詳細(xì)介紹

            參數(shù)規(guī)格:

            產(chǎn)品名稱:利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒

            產(chǎn)品貨號:FS-P013458

            產(chǎn)品規(guī)格: 50次

            產(chǎn)品分類:純化試劑盒

            產(chǎn)品運輸:低溫運輸
            9.jpg

             

            實驗過程:

            一、試劑準(zhǔn)備

            1. DNA模板

            2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)

            3.10×PCR Buffer

            4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

            5.Taq酶

            二、操作步驟

            1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

            10×PCR buffer             5μl

            dNTP mixl                 4μl

            引物1(10pM)               2μl

            引物2(10PM)              2μl

            Taq酶(2U/μl)            1μl

            DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

            加ddH2O至               50 μl

            視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

            2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

            3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

            4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

             

            注意事項

            1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

            2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

            3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

            4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。

            5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。

            6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

            7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。

            8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

            9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

            Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人轉(zhuǎn)錄因子Tbx3 ELISA試劑盒Multi-class antibodies: 96T

             SSTR5 生長抑受體5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

            Rhesus antibody Rh Goat  human IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgG  0.3ml

            Human c-jun ELISA Kit 人c-jun 96T

            C9orf156 9號染色體開放閱讀框156抗體 0.1ml

            BATF B細(xì)胞轉(zhuǎn)錄激活因子抗體 0.1ml

             SSTR5 生長抑受體5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

            Hb-AGE(Human hemoglobin-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物Multi-class antibodies: 48T

             phospho-c-Raf (Ser296) 磷化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

            Rhesus antibody Rh HABP2 透明質(zhì)結(jié)合蛋白2抗體  0.2ml

            HSP-70 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白70 96T

            PTEN 一種抑制基因抗體(C端) 0.1ml

            BAI1 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體 0.2ml

             phospho-c-Raf (Ser296) 磷化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

            Rabbit  rat IgM/Bio 生物標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml

            GALR1 甘丙肽受體1抗體 0.2ml

            Rhesus antibody Rh APOC3 載脂蛋白C3抗體  0.2ml

             gp130/IL-6R /FITC 熒光標(biāo)記白介-6受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

            Rhesus antibody Rh Rabbit  MG IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG  0.1ml

             prox-1 /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠prox-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
            利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒熱帶假絲酵母種屬: Candida│tropicalis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

            海氏腸球菌種屬: Enterococcus│hirae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0214生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

            海沈氏菌種屬: Shimia│marina分離基物: 生物樣/生物膜提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株;產(chǎn)微生物/硝鹽還原培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

            小克銀漢霉種屬: Cunninghamella│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

            硫類肝(HS/HPS)ELISA試劑盒鋅粒 99.99% metals basis亞鐵化鈉 CP5'-三腺苷(ATP)

            硫類肝(HS)ELISA試劑盒超純鋅粒 棒狀,99.9999% metals basis原甲酯 98%布林佐

            硫角質(zhì)(KS)ELISA試劑盒鋅 99.999% metals basis原甲三乙酯 99%布林佐(標(biāo)準(zhǔn)品)

            硫雌酮(E1S)ELISA試劑盒鋅粒 SP氟化銨 AR,98%羅硝唑

            S-甲基轉(zhuǎn)換(TPMT)ELISA試劑盒雙環(huán)己酮草酰二腙 AR氟化銨 GR,98%羅硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)

            硫化氫(H2S)ELISA試劑盒二乙酰一肟 AR氟化氫銨 AR,98.5%       屈膦二鈉四合物

            鱗狀癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒間甲基紅 Indicator氫氟 AR,40.0%乙基纖維

            鱗狀癌抗原1(SCCAg1)ELISA試劑盒米氏酮 98%氟 AR,40.0%維生 K1

            鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒4-硝基 CP氟 CP,40.0%9-氨基米諾環(huán)鹽鹽

            酯酰肌特異性酯C(PIPLC)ELISA試劑盒4-硝基 98%氟 49.5-50.5%溶液阿法替尼

            Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒硝氮黃 Indicator氨基胍碳?xì)潲} 98.5%阿扎那韋硫鹽

            C(PLC)ELISA試劑盒乙基黃原 AR,95%三氧化二銻 99.99% metals basis阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)

            脂轉(zhuǎn)運蛋白(PLTP)ELISA試劑盒酯 ≥99%, FCC三氧化二銻 AR,99.5%亞培南-西司他丁鈉

            脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)ELISA試劑盒酯 98%重去甲腎上腺 ≥98%(HPLC),USP長春西丁,長春西汀

            脂酰乙(PEth)ELISA試劑盒酯 Standard for GC,≥99.5%(GC)L-去甲腎上腺 98%妥英鈉

            脂酰絲氨(PS)ELISA試劑盒月桂鈉 98%辛弗林 98%奧卡西平

            操作流程:

            1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

            2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

            3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

            4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

            5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

            6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

            7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

             


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