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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013450
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成Multi-class antibodies： 48T
STAT2 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
Alpha1-AGP ELISA Kit 大鼠α1性糖蛋白 96T
NEURL 環(huán)指蛋白67抗體 0.2ml
phospho-Bcl-xL (Thr115) 磷化Bcl-xL蛋白抗體 0.1ml
STAT2 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激BMulti-class antibodies： 48T
Phospho-Nur77 (Ser351) 磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干擾α11抗體 0.2ml
TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原 96T
PTK6 酪蛋白激6/激抗體 0.2ml
CREB3L3 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體 0.2ml
Phospho-Nur77 (Ser351) 磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit rat IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.3ml
GDNF 膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體 0.1ml
IL-10R Beta/IL10RB/CDw210b/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介-10受體β抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/PE PE標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
PSP/FITC 熒光標(biāo)記抗PSP抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
口蹄疫病毒通用RT-PCR試劑盒假腸膜明串珠菌種屬: Leuconostoc│pseudomesenteroides提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0033生長(zhǎng)條件: 26℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
藤黃紫假交替單胞菌種屬: Pseudoalteromonas│luteoviolacea提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0223生長(zhǎng)條件: 26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母種屬: SaccharomycescerevisiaeHansen安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造果酒培養(yǎng)基: 51生長(zhǎng)條件: 28-30℃
曲霉種屬: Aspergillus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長(zhǎng)條件: 24-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
尿微量白蛋白(MAU)ELISA試劑盒鐿粉 99.9%1H-吡唑-3- 98%PD 173074
尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒茜紅 AR，≥80.0%(HPLC)2,2,2-三 98%PH-797804
尿相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA試劑盒茜黃GG IND二叔戊酰 98%KC-5103
尿嘧啶核苷化1(UPP1)ELISA試劑盒茜黃R AR雙(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮)銅 99%鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋
尿激型纖溶原激活因子(uPA)ELISA試劑盒藍(lán)6B IND(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)釔 99%鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋（標(biāo)準(zhǔn)品）
尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒天青I Biological stain烯 AR,>99%(GC)，包含180-200 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑維庫(kù)
尿激型纖溶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒天青I 94%烯, GR,>99.5%(GC)維庫(kù)（標(biāo)準(zhǔn)品）
尿激型纖溶原激活物(uPA)ELISA試劑盒天青Ⅱ Biological stain烯丁酯 AR,99%硫長(zhǎng)春地辛
尿激型纖溶原激活劑受體(uPAR)ELISA試劑盒天青Ⅱ AR烯丁酯 CP,98%扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷
尿激(UK)ELISA試劑盒鋁試劑 AR乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰二酚穩(wěn)定劑玉米核苷
尿肌酐(UCR)ELISA試劑盒性鉻藍(lán)K AR乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁基鄰二酚穩(wěn)定劑齊留通
尿苷二葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)ELISA試劑盒對(duì)氨基-N,N-二乙基硫鹽 AR,98%乙乙烯酯 CP,98%齊留通（標(biāo)準(zhǔn)品）
尿苷二葡萄糖轉(zhuǎn)移2(UGT2)ELISA試劑盒性品紅 Indicator，pH 1.0-3.1二硫化鉬 AR,99%依諾沙星(溶性）
尿苷二葡萄糖轉(zhuǎn)移1(UGT1)ELISA試劑盒燦爛綠 AR二硫化鎢 99.9%氧氟沙星
尿蛋白(UP)ELISA試劑盒溴甲酚綠 indicator (pH 3.8-5.4) 生物冰袋,500g/袋,190*120*20mm氧氟沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）
尿17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)ELISA試劑盒溴百里香酚藍(lán) ACS, Dye content 95 %特丁硫 分析標(biāo)準(zhǔn)品（劇品）阿巴卡韋
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