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詳細介紹
參數規(guī)格：
產品名稱：狗源性成分PCR檢測試劑盒
產品貨號：FS-02R6385
產品規(guī)格：48T
產品分類：恒溫熒光法
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
MMP-1/FITC 熒光標記基質金屬蛋白-1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Trk C/FITC 熒光標記酪激C抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCA2 三磷腺苷結合盒轉運蛋白2抗體 0.2ml
Mouse Guinea pig IgG/Gold 膠體金標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.5ml
Gax 生長終止特異性同源盒基因抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RAB-14 RAS相關蛋白癌基因Rab14抗體 0.2ml
Trk C/FITC 熒光標記酪激C抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
OSM(Human Oncostatin-M) ELISA KIT 人抑瘤MMulti-class antibodies： 48T
HPV 人類狀瘤病毒抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MCK10/CD167a/DDR1 神經上皮酪激抗體(癌激10) 0.1ml
TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脫氧核苷轉移 96T
RNF138 環(huán)指蛋白138抗體 0.2ml
CD96 CD96抗體 0.2ml
HPV 人類狀瘤病毒抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit chicken IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗雞IgG 0.1ml
GZMA/Granzyme A 顆粒A抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AD7C-NTP(human) 神經絲蛋白抗體(人) 0.2ml
MARCO/FITC 熒光標記巨噬細胞清道夫受體抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgG whole serum 兔抗IgG抗血清 1ml
TGM3/FITC 熒光標記轉谷氨酰3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
狗源性成分PCR檢測試劑盒酒類抗壞血比色法檢測試劑盒20次植物B12elisa檢測試劑盒
飲料抗壞血比色法檢測試劑盒20次雞乙酰乙檢測elisa檢測試劑盒
乳品抗壞血比色法檢測試劑盒20次禽腦脊髓炎elisa檢測試劑盒
肉類抗壞血比色法檢測試劑盒20次雞白介3elisa檢測試劑盒
藥片抗壞血比色法檢測試劑盒20次雞肌紅蛋白elisa檢測試劑盒
細胞抗壞血比色法檢測試劑盒20次雞硫類肝elisa檢測試劑盒
組織抗壞血比色法檢測試劑盒20次雞胰島樣生長因子1elisa檢測試劑盒
體液抗壞血比色法檢測試劑盒20次雞17-酮類固醇elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)液抗壞血比色法檢測試劑盒20次雞5核苷elisa檢測試劑盒
抗壞血待測樣品處理試劑盒20次牛α1性糖蛋白elisa檢測試劑盒
通用型A含量比色法檢測試劑盒20次雞促黃體elisa檢測試劑盒
血液A含量比色法檢測試劑盒20次雞γ干擾elisa檢測試劑盒
組織A含量比色法檢測試劑盒20次雞熱休克蛋白40elisa檢測試劑盒
食物A含量比色法檢測試劑盒20次花生凝集elisa檢測試劑盒
牛奶A含量比色法檢測試劑盒20次荊豆凝集elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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